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Lowry’s法（Folin-酚试剂法）测定蛋白质含量Determination of protein content by Lowry’s method 南方医科大学 生物化学与分子生物学实验教学中心 实验目的 掌握Folin-酚试剂法测定蛋白质含量的原理及其实验操作技术。 掌握制作标准曲线的要领和通过标准曲线求样品溶液中待测定物质含量的方法 。 总蛋白测定经典和常见的方法比较 选择测定方法时应考虑 实验对测定所要求的灵敏度和精确度； 蛋白质的性质； 溶液中存在的干扰物质； 测定所花费的时间等。 本法概述 1921年，Folin 首创，利用蛋白质分子中酪氨酸 和色氨酸残基（酚基）与还原酚试剂（磷钨酸-磷钼酸）起蓝色反应。 1951年，Lowry对此法进行了改进，先于标本中加碱性铜试剂，再与酚试剂反应，提高了灵敏度。 什么是双缩脲反应？ 两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲（H2N-OC-NH-CO-NH2），因分子内含有两个邻接的肽键，在碱性溶液中可与Cu2+发生双缩脲反应 ，生成紫红色络合物。 原理1 第一步：双缩脲反应 蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键（-CO-NH-），同样能在碱性条件下与Cu2+发生双缩脲反应，生成的紫红色络合物（蛋白质- Cu2+复合物）。且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10～120g/L范围内有良好