人类诱导性多能干细技术指导手册.docVIP

人类诱导性多能干细胞（iPS细胞） 技术指导手册 目录： 1. 前言 1 2. 人类胚胎成纤维细胞培养 2 3. 重编程载体构建 3 4. 病毒包装 4 5. 人类iPS细胞的诱导 6 6. iPS细胞鉴定 8 6.1碱性磷酸酶活性检测 8 6.2干细胞表面marker的免疫染色检测 9 6.3干性因子的去甲基化程度分析 10 6.4干细胞内源基因的表达分析 13 6.5端粒酶活性检测 14 6.6核型检测 15 6.7拟胚体形成 15 6.8畸胎瘤形成实验 15 7．干细胞技术培训及服务一览表 15 8．附录 16 1. 前言 iPS细胞最初从细胞因为它们准备和操作相对简单。其他细胞类型，包括来自胚层胚层和内胚层的细胞也可以（Eminili et al 2008）。2006年Yamanaka 和 Takahashi成鼠的成纤维细胞Oct3/4,Sox2,c-Myc, 和 Klf4Yamanaka 因子重编程为细胞细胞。2007年，在人类细胞中得以人类细胞的产生对退行性疾病的治疗产生巨大的影响（Takahashi et al ;Yu et al, 2007）iPS细胞具有和类似的功能，却绕开了胚胎干细胞研究一直面临的伦理和法律等诸多瓶颈，因此在医疗领域的应用前景非常广阔，成为干细胞研究的热点，《自然》和《科学》杂志分别将其评为2007年第一和第二大科学进展。随后，iPS细胞的研究