前列腺特异性膜抗原新型剪接变异体PSME的外周血定量表达检测分析及临床意义探讨.pdf

中山大学博士论文 前列腺特异性膜抗原新型剪接变异体PSM-E的外周血定量表达检测分析及其临床意义探讨 前列腺特异性膜抗原新型剪接变异体PSM-E的外周血 定量表达检测分析及其临床意义探讨 专 业：外科学(泌尿外科) 博士研究生： 瞿虎 指导教师：丘少鹏教授 中文摘要 研究背景和目的： 前列腺癌(Prostatecancer，PCa)是欧美国家最常见的男性恶性肿瘤，其 死亡率仅次于肺癌居第二位。我国前列腺癌发病率近年来呈显著增长趋势。由于 多数前列腺癌发病隐匿，早期临床症状轻微，当症状发生时多数已有局部浸润或 远处转移，晚期PCa治疗效果欠佳。如何早期、准确的诊断前列腺癌以便早期及 时治疗日益受到重视。通过实验室诊断技术，发现一些敏感性高、特异性强与 PCa相关的指标诊断PCa是关注的焦点。 antigen，PSA)是一个组织特异性而非肿瘤特异性的标记物。前列腺特异性膜抗 membrane 原(prostate—specificantigen，PSMA)作为与前列腺癌密切相关的 细胞跨膜蛋白，是近年来前列腺癌研究的热点。PSMA仅为人正常、恶性及转移 灶的前列腺细胞所表达，具有很高的前列腺组织特异性。研究者发现PSMA在正 常前列腺组织的表达很少，在前列腺增生及前列腺癌中表达增强，且尤以前列腺 中山大学博士论文 前列腺特异性膜抗原新型剪接变异体Ps-|卜乇的外周血定量表达检测分析及其临床意义探讨 癌表达最高，逐渐认识到PSMA比PSA更具有特异性，并在研究过程中还发现它 可用于早期诊断前列腺癌及其转移癌，以及前列腺癌术后的检测。 大量组织学研究结果证实了PSMA对于前列腺癌的高特异性，但血液学检测 方面存在争议，因健康人中也可测到血清PSMA且随着年龄增长浓度升高，特别 是50岁以后升高更明显，并且健康女性血清PSMA也随年龄增长而升高及乳腺癌 患者血清PSMA水平增高，认为PSMA并非PCa的特异性生物标记，许多正常及疾 病组织与血清PSMA水平相关。在肿瘤的早期阶段就有癌细胞进入血循环，运用 高灵敏度的方法检测外周血中的PSMAmRNA的表达将有助于PCa血行播散的判断 及早期诊断。RT-PCR法可检测出外周血中少量的mRNA，具有较高灵敏度，可用 于PCa的早期诊断。这方面的研究同样存在争议，有许多研究证实PSMAmRNA检 测的真实性和可靠性明显优于PSA，其特异性和敏感性更高，同样也有研究发现 PSMAmRNA在健康人中的假阳性率达38％，认为在PCa的诊断中其临床效用低， 需另行设计特异性引物及定量分析区分循环中的前列腺细胞。 PSMA存在可变剪接现象，通过可变剪接可以改变原有蛋白的功能，并且与 肿瘤的发牛发展、侵袭转移有关。PSM-E是前期在为进行基因重组PSMA前列腺 癌疫苗的研究中，本研究组首次在世界上发现的一种PSMA新型剪接变异体，基 因序列分析及编码蛋白预测分析表明，PSM-E不同于PSMA及目前已报导的其它 剪接变异体，其基因序列编码的蛋白可能完全是一种新的细胞跨膜蛋白。而此前 已发现的剪接变异体PSM’、PSM-C、PS卅D则均位于细胞浆，缺少蛋白质的跨膜 区，属于非跨膜蛋白，缺乏PSMA原有的生物学功能及对前列腺癌诊断和治疗时 的靶细胞定位作用。 前期研究中我们发现在肾、膀胱、十二指肠、回肠、肝癌及乳腺癌肿瘤组织 中可检测到PSMA mRNA水平在正 中检测到，PSM—E仅表达于前列腺癌而在其它器官中缺如；PS卅E U 中山大学博士论文 前列腺特异性膜抗原新型剪接变异体PsM-E的外周血定量表达检测分析及其临床意义探讨 mRNA 高。这证明PSM—E是一种较PSMA特异性更高的前列腺标记物，组织PSM-E 表达水平可用于区分正常前列腺、前列腺增牛和前列腺癌。 既往已有研究证实外周血PSMA检测对PCa的诊断较PSA特异性更高，那么 对于剪接变异体PSM—E来说，PSY—E在PCa和BPH患者的外周血中是否表达?