青霉素类抗生素残留分析的前处理及其HPCE检测方法的研究.pdf

摘要 青霉素类抗生素广谱高效，药物学性质良好，且几乎没有毒性，在畜牧兽医领域 也得到了广泛的应用，被大量应用于动物疾病预防与治疗，由于部分养殖单位不合理 用药导致残留现象严重，人类食用此类存在青霉素类抗生素残留的动物源性产品会对 身体造成一定危害甚至产生严重过敏反应，所以对动物源性食品中此类抗生素残留的 有效监测已经成为保障食品安全的一个重要环节。为了适应残留检测的需要，建立灵 敏度、准确度和精确度均符合残留检测要求的青霉素类抗生素残留分析方法成为研究 的重点。本实验结合国内外对青霉素类抗生素的药理研究及残留分析方法的研究，建 立了分析青霉素类抗生素中青霉素、氨苄青霉素、阿莫西林三种药物的良好前处理方 法及毛细管电泳分离分析方法。 本实验开展了以下研究工作t 1．鸡肌肉组织中青霉素类抗生素残留分析的四种前处理方法的建立与比较 本实验建立了鸡肌肉组织中青霉素类抗生素残留分析的四种前处理方法，并通过 实验数据分析比较确定出最优的鸡肌肉组织中青霉素类抗生素残留分析前处理方法， 为本课题的后续研究提供实验基础。本实验建立了溶剂提取、固相萃取、基质固相分 散萃取、基质固相分散萃取一固相萃取联用四种前处理方法，对所得数据及图谱进行 分析发现，相比之下固相萃取法具有回收率水平较高、图谱背景干扰小的特点，可满 足残留分析的要求，且此法操作简单，鸡肌肉组织中的三种青霉素类抗生素直接采用 磷酸盐缓冲液提取，乙腈去蛋白，然后使用C18固相萃取柱净化，80％乙腈洗脱，洗 脱液4012高纯氮气吹干，微孔滤膜过滤后即可使用仪器检测。故最终确定固相萃取 法为处理鸡肌肉组织样品的前处理方法。 2．高效毛细管电泳分离青霉素类抗生素方法建立 实验首先对几种缓冲体系进行比较，硼砂／盐酸缓冲体系可对青霉素、氨苄青霉 素、阿莫西林进行较好分离，确定为实验所需缓冲体系。通过紫外扫描确定198nm 为检测波长。然后通过四因素三水平正交实验，分别对不同的缓冲液离子浓度、pH 值、分离电压和运行温度对青霉素、氨苄青霉素、阿莫西林分离效果的影响进行分析， kV、运行温度 结果表明缓冲液离子浓度为30mmom／L、pH为7．8、分离电压为18 为25C为最佳电泳条件。最终采用的毛细管电泳分析条件为：弹性石英毛细管柱 定的最佳电泳条件下青霉素、氨苄青霉素、阿莫西林完全分离且峰形较佳。 3．SPE--HPCE分析鸡肌肉样品中的青霉素、氨苄青霉素、阿莫西林残留方法 建立 实际鸡肌肉样品采用磷酸盐缓冲液提取、乙腈去蛋白、正己烷脱脂、SPE净化后 阿莫西林的检测限为0．1pg／g定量限为0．399／g。三者在鸡肌肉组织中的回收率范围 分离的杂质峰出现。 目前青霉素类抗生素的仪器检测方法报道的多为高效液相色谱法，毛细管电泳方 法检测鸡肌肉组织中残留的青霉素类抗生素的报道国内外均不多见，本研究还在对四 种前处理方法进行建立与比较后选出最优前处理方法，为本课题后续研究提供了理论 与实验基础。 关键词鸡肌肉组织，青霉素类，前处理，高效毛细管电泳，残留分析 II Abstract Penicillinsare antibioticsusedin medicineforthe 13-1actam widely veterinary themcan in treatmentand of resultthe ofresiduesin preventiondisease．Using presence edibletissueswhich individuals Canleadtohealth for whoare to problems