PUMA基因转染对人肺癌A549细胞的促凋亡作用及机制的研究.pdf

摘要 摘要 肿瘤是当今危害人类健康最严重的疾病之一。p53上调凋亡调控因子(p53 modulatorof up-regulated 一，具有强大的促凋亡作用。研究发现PUMA表达水平降低与肿瘤的发生密切 相关，上调肿瘤细胞中PUMA的表达可以增强肿瘤细胞对放化疗的敏感性，说 明PUMA是一个非常有前景的肿瘤基因治疗靶点。 目的： 体外观察PUMA基因转染对人非小细胞肺癌细胞A549的增殖、凋亡等生 物学行为的影响，并探讨其可能的分子机制及与DDP诱导的细胞死亡之间的 关系；观察PUMA基因对肺癌细胞A549裸鼠移植瘤体内基因治疗的效果，旨 在为临床上肺癌的治疗提供实验依据。 方法： 014417)基因序 Invitrogen公司测序鉴定和GenBank上PUMA(登陆号：NM 列一致，应用PrimerPremier5．0软件分析并设计PCR引物，引物合成由 菌、质粒的提取纯化。 33342染色观察细胞凋亡的形态学变化，应用流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率 的改变，RT．qPCR和