石墨烯和信号放大技术在光分析法检测生物活性物质中的应用.pdfVIP

的研究 设计了一种新颖的杂交链式反应．滚环复制放大技术(HCR．BRCA)，采用化 学发光方法检测DNA甲基化酶的活性。实验分为三个阶段：1)甲基化及DNA 成环过程：首先，两条互补的ssDNA杂交，加入DNA甲基转移酶以及具有相同 I限制性内切酶，在修饰上甲基的识别位点之间将DNA链切开， 识别位点的Dpn 分别得到两条长短不一的ssDNA。然后放入一条可与长链DNA链互补的DNA 引物DNAPI、DNA P2(其末端含氨基与磁珠结合)并将末端磷酸化，加入T4连 下引发滚环复制，并引入与DNA链互补的两条可发生杂交链式反应的引物DNA H1、DNA H2，末端含生物素。3)化学发光检测过程：磁性分离留磁珠，加入亲 测。该体系对DNA甲基化酶的检测限可达到到0．52U／mL。 关键词：氧化石墨烯信号放大技术凝血酶谷胱甘肽DNA甲基化 ANDSIGNAL APPLICATl0NOFGRAPHENE ANALYSIS AⅣ口LIFICATl0NTECHNOL