富士苹果芽变的细胞学与分子生物学鉴定研究.pdfVIP

缩 略词表 RAPD 随机扩增多态性DNA RFLP 限制性片段长度多态性 ISSR 简单重复序列区fIni PCR 聚合酶链式反应 Tris 三羚甲基氨基甲烷 TEbuffcr TE缓冲液 NaBisufite 偏重亚硫酸钠 EDTA 乙二胺四乙酸 EB 滨化乙锭 〕)、E Tris、乙酸、EDTA dNTP 脱氧核糖核营三磷酸 摘 要 本文以16个富士系苹果的芽变初选优系及其对照品种富士、长富2、长 富6为试材，进行了花粉粒形态性状、气孔大小密度等M%a学方面的研究， 并应用RAPD和SS‘“一材进行了艳子生物学鉴定，等果如下: 1.无论是花粉粒的大小、形态还是气孔的大小、密度，芽变初选优系与其 对照之间均无显著差异，所有试材的花粉粒的形状均为圆三角形。 2.建立了苹果RAPD扩增反应体系:25uI反应液中，10XBuffer2.5A1 MgC122.OmM,dNTP0.19mM,primer0.24uM,DNA30ng,TaqDNApolymerase 11)。 3.筛选了30Q个随机引物，其中51147和51189鉴别出丰6芽变初选优系; S1125,51141,51138鉴定出D,芽变初选优系;S1073,51039,51064.S1056 雏别出D2芽变初选优系:S1124,51127,51140,51179,S1181鉴别出了 D,芽变初选优系;S1146,51302,51090,S1291鉴定出了D」芽变初选优系。 4.建立了苹果 ISSR反应体系:25u1反应液中，10XBuffer2.5uL, MgC121.5mKdNTPO.2OmM,primerO.4PM,DNA30ng,TaqDNApolymerase 1U。 5.构建了富士、长富2、长富6、红星、新世纪、美国8号6个品种的ISSR 指纹图谱，其，扫IS061构建了富士、长富2、长富6三个品种的指纹图谱， IS026成功地构建了富士、红星、新世纪、美国8号的指纹图谱。 6.运用ISSR技术鉴定出了9个富士芽变初选优系，其中有5个芽变初选优 系应用RAPD技术无法鉴定。) 关键词:富士苹果丫芽变鉴定:RAPD:ISSR Abstract 16bud mutation primaryelectionstrainsof`Fujiappleandorigin cultivarsasmaterialsthecytologysuchaspollenpatterncharacter.stomata sizeanddensitywerestudied,andappliedRAPDmolecularmarkertechnology identifiedthesematerials.Inaddition ,constructedthreecultivarsISSR fingerprint.Resultsshowedthat: 1.Pollensizeofeverysportlinewasidenticaltotheoneofcontrolcultivar,all ofthemweretriangle,thesizeandshapewereregular,Stomatadensityandsize ofeverybudmutationprimaryelectionlinewassametothoseofc