《马氏珠母贝TLR2基因cDNA的分子特征及组织表达分析-论文》.pdfVIP

中回雇擘c童攉 2014，30(20)：35—41 ChineseAgriculturalScienceBulletin 马氏珠母贝TLR2基因cDNA的分子特征及 组织表达分析 师尚丽，杜晓东，焦 钰，黄荣莲，王庆恒，邓岳文 (广东海洋大学水产学院，广东湛江524025) 摘 要：TLR2(tolllikereceptor2)是TLR模式识别受体家族的重要成员之一，参与有机体的免疫识别。 研 究采用eDNA末端快速扩增 (RACE)技术克隆获得 了马氏珠母 贝(Pinetadamartensii)TLR2基 因 (PmTLR2)cDNA的全长序列并对其序列特征进行分析；同时检测 7Pm弛 2基因的mRNA在马氏珠母 贝六个组织中的表达。结果表明：尸mTLR2基因的eDNA全长2614bp，包含41bp的5’UTR，299bp的3’ UTR，23bp的polyA，开放阅读框为2274bp，编码758个氨基酸残基。多序列比对显示PmTLR2与牡蛎 TLR2的序列相似性最高，为51％；Smart软件分析显示PmTLR2的蛋白序列中含有8个亮氨酸重复序列 (Leucinerichrepeats，LR )，1个C端亮氨酸富集区(Leucine。richrepeatC—terminal，LRR-CT)，1个N端 亮氨酸富集区(Leucine．richrepeatN．temrinal，LRR—NT)，1个(Toll／IL一1R)同源结构域(Tni)；荧光定量 PCR分析表明PmTLR2在马氏珠母贝肝胰脏、性腺、血淋巴、鳃、外套膜和闭壳肌六个组织中均有表达， 鳃中表达量最高。本研究为进一步阐述PmTLR2在马氏珠母贝免疫应答中的作用机制提供理论基础。 关键词：TLR2；马氏珠母贝；基因克隆；荧光定量PCR 中图分类号：$917．4 文献标志码：A 论文编号：2014—0839 M olecularCharacterizationandTissueExpressionAnalysisofPmTLR2Genefrom Pinctadamartens~ ShiShangli，DuXiaodong，JiaoYu，HuangRonglian，WangQingheng，DengYuewen (FisheriesCollege,GuangdongOceanUniversity，ZhanjiangGuangdong524025) Abstract：Tolllikereceptor2(TLR2)isanimportantcomponentintheTLRsfamily，whichisonefamilyof pathogen—associatedmolecularpatternrecognizingreceptors(PRRs)．Inthisstudy，usingrapidamplificationof cDNAendstechnology(RACE)，theauthorsobtainedthefulllengthofPmTLR2genecDNAfromPinctada martensii(PmTLR2)．ThefulllengthofPmTLR2eDNAwas2614bp，containinga5’untranslatedregion (UTR)of41bpanda3’UTRof299bpwith27bppolyAtail．Theopenreadingframe(ORDwas2274bp encoding 758aminoacidresidues．Multiplesequencealignmentindicated PmTLR2 had 51％ sequence identitywiththatrfom Crassostreagigns．SMARTprogram analysisindicatedPmTLR2containedeightLeucine richrepeats(LRRs)，oneLeucine-richrepeatC—terminal(LRR-CrI)，oneLe