《去甲基化机制在腺苷及同型半胱氨酸诱导肝癌HepG2细胞凋亡中的作用-论文》.pdfVIP

中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2014Jul；30(7)：973～9 。973 · 网络 出版时间：2014—6—2416：35 网络 出版地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．3969／j．issn．1001—1978．2014．07．020．html 去甲基化机制在腺苷及同型半胱氨酸 诱导肝癌 HepG2细胞凋亡中的作用 项梦琦，刘丽璇，邓 巍，周小涛，陈沛锐，郭益添，叶艳清，蒲泽锦，吴灵飞 (汕头大学医学院第二附属医院消化 内科 ，广东汕头 515041) doi：10．3969／j．issn．1001—1978．2014．07．020 愈，大多数进展期肝癌则因对常规化疗药物耐药而 文献标志码：A 文章编号：1001—1978(2014)07—0973—07 疗效不佳，因而寻找新的治疗方法增加抗癌效果尤 中国图书分类号：R329．25；R341．7；R342．4；R735．7 为重要 。核苷类物质如腺苷(adenosine，ADO)的细 摘要：目的 探索去甲基化机制在腺苷 (ADO)及 同型半胱 胞毒性作用近年受到关注，它可诱导多种实体与血 氨酸(HCY)诱导肝癌 HepG2细胞凋亡 中的作用。方法 液肿瘤细胞凋亡，是有前景的抗癌药物…。我们前 CCK8法检测不同浓度腺苷 (1．0、2．0、4．0otol·L )单独 期研究证实，ADO通过膜转运体进入细胞 内发挥细 或者联合同型半胱氨酸作用肝癌 HepG2细胞不同时间(6、 胞毒性作用，其机制与内质网应激 (endoplasmicre— 12、24h)后细胞存活率 ；亦使用DNA甲基化酶抑制剂5-Aza— CdR观察其对细胞生长的影响。AnnexinV—FITC／PI双染法 ticulumstress，ERS)凋亡途径有关 。但是ADO 检测细胞凋亡率，流式细胞术检测细胞内线粒体膜电位：实 触发凋亡的机制仍不清楚。目前，表观遗传学的研 时荧光定量 PCR及Western免疫印迹法分别检测caspase-3、 究表明，去甲基化作用可活化抑癌基因如 p53而诱 caspase一8 caspase-9 MDM一2、p53 CytochromeC DNMT1 DN— 导癌细胞凋亡 J。生理条件下，ADO可与同型半胱 M33a、DNMT3b等因子的表达量。结果 ADO联合 HCY明 氨酸(homocysteine，HCY)合成 s一腺苷同型半胱氨酸 显抑制 HepG2细胞增殖，呈剂量和时间依赖性 ；不同浓度 (s-adenosyIhomocystejne，SAH)而降低细胞 内的甲基 ADO联合HCY(1．0、2．0、4．0otol·L )作用HepG2细胞24 化水平 J。有文献证实，体外联合使用 ADO及 h，细胞凋亡率分别为 (18．63±1．25)％，(29．42±2．37)％， HCY可导致细胞 内SAH水平增高，且比单独使用 (42．47±3．09)％，均明显高于阴性对照组 (1．30±0．82)％， ADO更为明显 J。为了探讨细胞 内甲基化代谢是 P0．01；联合用药组线粒体膜电位明显下降，分别从空白对 照组 (674．15±82．8)％下降为 (428．38±54．5)％、(297．78 否参与了ADO细胞毒性作用，我们采用 ADO联合 - 4-30．5)％、(74．45±5．73)％，P0．01；ADO联合 HCY导 HCY作用肝癌 HepG2细胞，另外，给予DNA甲基化 致caspase一3、caspase一8、caspase-9、p53、CytochromeC表达上 酶(DNAmethyltransferases，DNMTs)特异性抑制剂 调，MDM-2表达下调。ADO联合 HCY或 5一Aza—CdR处理