TGF-β1对滋养细胞HTR-8%2fSVneo细胞系增殖侵袭的影响及其机制的研究.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………4 及机制研究 前言……………………………………………………………………7日U吾……………………………………………………………………’7 材料与方法……………………………………………………………9 结果……………………………………………………………………14 附图……………………………………………………………………15 附表……………………………………………………………………18 讨{仑……………………………………………………………………22 结j念……………………………………………………………………25 参考文献………………………………………………………………26 l 综述TGF一[31／smad通路对滋养细胞增殖和浸润的影响的相关研究…3 致谢…………………………………………………………………………38 个人简历……………………………………………………………………39 中文摘要 及机制研究 摘 要 目的：滋养细胞是人体极为奇特的细胞，来源于胚胎的胚外层细胞， 具有侵蚀性，在胚胎植入过程中，滋养层细胞发挥着类似肿瘤的特性而侵 入子宫基质，相应的子宫反应内膜蜕膜化，包括细胞分化及细胞外基质重 建，并创造了一个环境，在最初阶段允许滋养层细胞的侵入，继而又控制 其过度侵入以形成胎盘。这一侵蚀过程，在时间及空间上受到母体及自身 的多种旁分泌和自分泌因子的严格网络级联调控，其中任一环节发生异 常，都有可能会导致自然流产、先兆子痫、妊高症、绒毛膜癌等妊娠相关 疾病。转化生长因子一p(transforminggrowth 有许多细胞因子所组成的大家族，其信号沿TGF．p族配体一受体一SMAD 蛋白一转录因子一DNA表达等步骤来控制调节细胞的增殖、分化、移行 和凋亡。TGF．Bl是最早证实参与滋养细胞侵入调节的细胞因子。研究发 现，受孕子宫内膜表面上皮细胞、基质细胞、蜕膜细胞中TGF-p1及TpR 较未孕时显著增加；胎盘绒毛小叶的合体滋养细胞、细胞滋养细胞及绒毛 助于滋养层的黏附，又避免滋养细胞过度增殖、浸润，但具体机制尚未阐 TGF．B mRNA 的表达情况，进一步揭示该信号通路在滋养细胞调控机制中的作用，从而 为滋养细胞疾病的治疗提供新的思路。 方法： l本文的研究对象为永生化的滋养细胞HTR-8／SVneo细胞系。 2取指数生长期的HTR-g／SVneo细胞按初始浓度为3x104／mL接种于 96孔板，37℃、5％C02培养箱中培养，融合度达到60％后换成无血 中文摘要 72h终止培养并收获细胞；同时设立零对照组及空白对照组，每组设 6个平行孔，采用MTT比色法检测各组细胞的增殖活力； 3 达到60％后换成无血清培养基，使其继续饥饿同步化24h，加入不同 链反应(Reverse Chain TranscriptionPolymerase mRNA表达情况； 检测各组Smad3、Smad7 4 袭力。 结果： l 对较大时(1 5．0．200．Opg／L)，细胞的增殖情况又逐渐减弱，总体呈 显著增高(尸O．05)。 2与对照组比较，10．0“g／L mRNA的表达量显著下降(氏0．05)，Smad7mRNA的表达量显著 增高(尸0．05)，1．0pg／L、100．opg／L 有明显改变(P0．05)。 3 显增加，侵袭力增强(PO．05)。