补气活血方对慢性支气管炎肺气虚证大鼠细胞凋亡及其相关基因蛋白bcl-2、fas表达的影响.pdfVIP

中文摘要 补气活血方对慢性支气管炎肺气虚证大鼠细胞凋亡及 相关基因蛋白bcl．2、fas表达的影响 摘 要 目的：观察补气活血法对慢性支气管炎(CB)肺气虚证 大鼠细胞凋亡及相关基因蛋白bcl一2、fas的影响，探讨其治 疗作用机理，进一步揭示CB肺气虚证形成的病理机制，为 临床防治该病提供实验依据。 方法：选用健康Sprague 雄各半)，实验前一周置于实验环境中喂养。采用改良烟熏 法复制CB肺气虚证动物模型。将造模各组大鼠置于特制的 1 lmxmxlm的烟室中点燃熏烟，每日2次，每次30分钟， 持续40天。正常对照大鼠则置于正常无烟环境中饲养。 模型复制成功后，将CB肺气虚证大鼠随机分为分为模 型对照组(模型组，model group)、补气活血高剂量组(高 剂组，high．dose group)、补肺汤组(tonifylungrecipegroup)，并设不加任何 处理的正常对照组(normal group)。每组10只，雌雄各半。 5组均于造模结束后第2天起连续灌胃生理盐水或药物 21天，每日1次。正常组与模型组灌服生理盐水，均为 用药量的14倍)，以O．1 89／ml灌胃；低剂组每日用药剂量为 胃；补肺汤组每日用药剂量为8．639／kg(相当于临床成人用 药量的7倍)，以0．099／ml灌胃。 中文摘要 于灌胃结束后第2天，各组大鼠分别麻醉后处死，开胸 石蜡包埋，切片，用于普通HE染色及TUNEL检测、免疫 组织化学染色。取数块组织，用于流式细胞术检测。。 结果： 1一般状态观察：造模组大鼠在烟熏12天后开始出现呼吸困 难，咳嗽并兼有痰呜音，蜷卧倦怠，饮食量及活动量减少， 毛发光泽渐失，鼻腔可见分泌物，质地清稀，消瘦便溏，腹 部有硬块，舌色紫暗。正常组未见异常。与正常组相比较， 造模组体重增长缓慢，与造模40天时体重增幅比较，造模 两组体重变化有明显差异(氏O．05)。 2肺组织形态学观察 2．1肉眼观察：正常组大鼠双肺外观无异常，肺叶轮廓清晰， 表面光滑柔软，粉红色，弹性良好。模型组大鼠双肺可见灰 黑色斑点，肺表面略显不平，表面无光泽，边缘有点状出血。 2．2光镜观察：正常组可见细支气管黏膜上皮完整，细胞排 列整齐，细支气管壁及肺泡无明显病理形态学改变。模型组 可见细支气管管腔增大，管壁明显增厚，部分上皮细胞坏死 脱落，伴有大量慢性炎细胞浸润，小静脉有淤血现象。各治 疗组与模型组相比均有明显改善。 3各组大鼠支气管及肺组织细胞凋亡 3．1TUNEL和免疫组化检测各组大鼠肺炎性细胞凋亡 3．1．1TUNEL检测肺炎性细胞凋亡 模型组大鼠支气管及肺组织炎细胞凋亡百分数明显低 中文摘要 于正常组，有统计学意义(PO．05)。治疗组与模型组炎细 胞凋亡数比较明显增加，组间比较有统计学意义(氏O．01)， 其中高剂组与低剂组相比，凋亡数目明显增加(尸O．01)； 高剂组与补肺汤组相比明显增加，有统计学意义(PO．01)； 低剂组与补肺汤组比较无统计学意义(尸O．05)。 3．1．2免疫组化法检测凋亡基因蛋白bcl一2 模型组平均灰度值明显低于正常组，有统计学意义 (PO．01)。与模型组相比，各治疗组的平均灰度值明显升高， 组间比较有统计学意义(PO．01)，其中高剂组与低剂组相 比平均灰度值升高，有统计学意义(PO．01)；高剂组与补 肺汤组比较平均灰度值升高，有统计学意义(氏O．01)；低 剂组与补肺汤组相比较，平均灰度值升高，有统计学意义 (PO．05)。 3．1．3免疫组化法测凋亡基因蛋白fas 模型组平均灰度值明显高于正常组，有统计学意义 (PO．01)。与模型组相比，各治疗组的平均灰度值明显降低， 组间比较有统计学意义(尸O．01)，其中高剂组与低剂组相 比平均灰度值降低，有统计学意义(P0．01)；高剂组与补 肺汤组比较，平均灰度值降低，有统计学意义(氏O．01)； 低剂组与补肺汤组相比较，平均灰度值降低，有统计学意义 (尺O．05)。 3．2流式细胞术检测各组大鼠