肺血少型先心病幼猪动物模型的建立及其肺血改变对未成熟肺血管形态发育和功能的影响.pdf

·中 文摘要· 第一部分．介入和外科技术相结合建立紫绀 型肺血少先心病幼猪动物模型 【目的】．采用一种新颖的介入和外科相结合的Hybrid方法建立紫绀型肺 血少先心病动物模型。 【方法】．采用生后l～2月的幼猪，体重8～12埏，分为两组，每组8只。 a)正常对照组(C．group，n=8)：即假手术组，只开胸无手术处理；b)肺 血减少组(D—group，n-8)：右前外侧第三肋间开胸，经右心房表面送入扩张 器行人工房间隔造口术；再经左前外侧第三肋间开胸，将主肺动脉套带环缩。 所有动物正常饲养2个月。然后正中开胸，测量跨肺动脉环缩处的压差；分 别抽外剧动脉、右心房、肺静脉、左心房血液行血气分析，计算Qp／Qs：抽 外J土J静脉血测量血球压积(HCT)和血红蛋白浓度(HB)。 【结果】．对照组8只均存活，平均体重增加到23．0蚝。肺血减少组存活6 只，平均体重增加到20．6k。肺血减少组的动脉血氧分压(Pa02)、动脉血 氧饱和度(Sa02)、HCT和HB分别为52．9mmHg、85．6％、49．8％和16．6g／dl。 18．O 对照组的Pa02、Sa02、HCT和HB则分别为lmmHg、98．0％、37．9％和 12．29／dl。二组间对应指标相比均有显著性差异(PO．001)。利用四点血气值 和公式计算所得，肺血减少组的Qp／Qs为0．54：l。 【结论】．应用介入和外科相结合的Hybrid方法，通过人工房间隔造口和 肺动脉环缩，成功建立了一种新颖的紫绀型肺血少先天性心脏病动物模型， 为研究紫绀型肺血少先心病的临床病理和生理提供了一种有用的工具。 【关键词】： 先天性心脏病；紫绀；动物模犁：猪 第二部分．肺血减少肺动脉低压时肺组织的病理形态观察和分析 【目的】．利用我们己建立的紫绀犁肺血少动物模型，对肺血减少时未成熟 肺小血管进行病理形态观察和形态半定量分析，研究肺血减少时未成熟肺小 血管的发育特点。 【方法】．健康幼猪16只，分为紫绀肺血减少组(D组，n=8)和对照组(C 组，n=8)。首先利用第一部分描述的方法建立紫绀型肺血少先心病动物模型。 两组动物正常饲养2个月，麻醉和正中开胸，按照动物活检取材步骤，分别 取双侧上、中、下肺叶组织各一块，4％的多聚甲醛充分固定后制片，行H—E 和弹性蛋白+VanGieson染色。光镜和透射电镜观察两组动物肺小血管和肺 实质的病理形态特征：利用显微镜一微机图像处理系统，形态半定量测量分析 肺小动脉平均中膜厚度(MT)及中膜厚度百分比(MT％)、平均中膜面积(MS)及中 膜面积百分比(MS％)；计数单位面积肺小动脉数目(APSC)和单位面积肺泡数 量(MAN)；计算同一张切片所有泡内肺动脉(IAPA)中肌型动脉(CMA)、部分 肌型动脉(PMA)和无肌犁动脉(NMA)的比例。 【结果】．对照组(C组)8只均存活；肺血减少组(D组)存活6只，D 组成功建立紫绀犁肺血少先心病动物模型。同对照C组动物相比，光镜观察 下D组肺小动脉管腔普遍扩大，形态不规则，管壁厚薄不均，部分弹力纤维 层中断、缺失，肺小动脉中层退化和发育不良，部分肌型动脉和无肌型动脉 的比例较对照组高，而肌型动脉的比例却相对较低(尸0．001)。D组肺小动 面积肺小动脉数(APSC)较C组少(尸0．01)，而肺泡数与C组无显著差异 (尸O．05)。电镜观察显示肺血减少组肺小血管内皮细胞胞质肿胀，基底膜 变薄：弹力纤维排列不整齐，有的区域萎缩变薄或中断；血管中层平滑肌轻 度萎缩；细胞器减少，线粒体空泡化；部分肺泡II犁上皮细胞增生明显，板 层体丰富。 【结论】．对实验性紫绀型肺血少动物模型的肺组织进行病理形态观察和分 析发现，肺血流较正常减少和肺动脉低压时肺小血管发育呈现明显不良或退 化，同时伴有外周肺小动脉数量减少，但是对肺泡的形态发育和数量影Ⅱ向不 大。形态结构异常影响器官的正常功能，说明保持正常的肺血流或尽早改善 肺血少状态是促进外J土J肺血管正常发育和改善全身状况的关键。 【关键词】： 形态定量分析；肺动脉；发育不良；先天性心脏病，紫绀 第三部分．肺血少肺动脉低压时肺组织形态变化的生物学基础 【目的】． 紫绀型肺血少先心病动物模型的肺血管和肺组织形态结构与正 常不同，即发生了细胞外基质重颦。通过测量肺细胞外基质中部分结构性蛋 白和细胞因子的变化，分析肺血减少时肺细胞外基质重颦和形态结构变化的 生物学基础。 【方法】．