液相色谱郭.pptVIP

厦门大学精品课程 仪器分析(含实验) 厦门大学精品课程 仪器分析(含实验) 实验7、8 液相色谱分析混合样品中的苯和甲苯 授课老师：郭慢丽 联系方式 实验目的 液相色谱基本知识 实验内容 实验报告要求 一、液相色谱基本知识 集富集、分离和检测于一体的高灵敏、高选择性分析方法。 起源 按流动相的不同： 气相色谱 高效液相色谱 只能分析挥发性物质，只能分析20%的化合物 不能用于热不稳定物质的分析 用毛细管色谱可得到很高的柱效 有很灵敏的检测器如ECD和较灵敏的通用检测器（FID和TCD） 流动相为气体，无毒，易于处理 运行和操作容易 仪器制造难度较小 几乎可以分析各种物质 ?? 可以用于热不稳定物质的分析 色谱柱不能很长，柱效不会很高 没有较高灵敏的通用检测器① 流动相有毒，费用较高 运行和操作比GC难一些 仪器制造难度大 分类 分离原理 各组分的性质和结构不同 与固定相之间的作用力大小不同 各组分在固定相中停留的时间不同 储液瓶 分离柱 进样器 高压泵 检测器 记录仪 梯度洗脱装置 仪器 高压：150～350×105 Pa； 特性：压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀 进样装置：六通阀 色谱柱 CNW Athena C18 120 ? 4.6 mm ? 250 mm，5 ?m Art# 8.462571.0001 S/N 0AG71U06 FLOW C18 硅胶 电化学 荧光 紫外 二极管阵列（DAD） 检测器 紫外检测器的溶剂影响 峰数目——判断组分的最少个数 tR——定性分析 峰面积或峰高——定量分析 tR及峰宽——评价色谱柱分离效能 两峰间的距离——评价固定相和流动相选择是否合适 ← 色谱峰 保留时间 tR（min） 基线 ↓ 峰高 峰宽 信号 色谱图（色谱流出曲线） 色谱定性方法 （1）用已知物对照进行定性 （2）与其他仪器联用（质谱、红外） （3）数据库检索 色谱定量方法 （1）外标法（进样体积要准） （2）内标法 （3）归一化法 峰面积 浓度 实验内容 1. 对混合样品（苯、甲苯）进行定性。 2. 分组配制标准溶液。 3. 外标法定量，测定未知样品浓度。 要求：每人都要有进样机会！！！ 操作步骤 1. 开机，调节实验条件如下： 柱温：室温 流动相流量： 1.0 mL/min 流动相配比：甲醇 : 水 = 90 : 10 检测波长：254 nm 2. 标准溶液的配制：（储备液浓度：10 ?L/mL） 3. 定性和定量分析：（进样量：2 ?L） 定性，记下保留时间；定量，记下峰面积。 注意事项 1. 微量注射器驱除气泡。 2. 进样的正确操作。 3. 数据记录。 实验报告要求 一、实验目的 二、实验原理（简要） 三、实验仪器（画出液相色谱流程图） 四、实验内容：定性、定量、未知样品测定 要注明色谱条件 五、实验结果：定性（绘制色谱流出曲线图） 定量（绘制标准曲线） 六、讨论 厦门大学精品课程 仪器分析(含实验) 厦门大学精品课程 仪器分析(含实验)