血管紧张素（1—7）对胆管结扎诱导的肝纤维化大鼠肝窦血管生成的抑制作用.pdfVIP

中华肝脏病杂志2013年 l2月第2l卷第 12期 ChinJHepatol，December2013，Vo1．21，No．12 907 · · 肝纤维化 ·月干 - 血管紧张素(1—7)对胆管结扎诱导的 肝纤维化大鼠肝窦血管生成的 抑制作用 宁佐伟 张文雍 李洋 蔡双明 张莉莉 李旭 摘【要】 目的 探讨血管紧张素 (卜7)(Ang (1—7))对胆管结扎所致肝纤维化大鼠肝窦血管生 成的抑制作用及相应的分子机制。 方法 将 18只Wistar雄性大鼠随机分为假手术 (SHAM)组， 胆总管结扎 (BDL)组和Ang (1—7)治疗组。假手术组 ：行开腹术再关腹，在腹腔埋注射泵，以25 g ‘ ·h 的速度持续注射等渗盐水 ；BDL组 ：开腹结扎胆总管建立肝纤维化模型，同时在腹腔 埋注射泵，以25 g·kg-·h-的速度持续注射等渗盐水 ；Ang(1—7)治疗组 ：BDL建立肝纤维化模 型，同时在腹腔埋注射泵，以25 g k‘g-·h-的速度持续注射Ang(1—7)。4周后宰杀动物，取肝组 织，行苏木素一伊红染色，进行肝纤维化评分 ；Masson胶原染色，测定胶原的表达 ；利用免疫组织化 学，免疫印迹 (Westem blot)，组织免疫荧光检测血管生成的标志 ：血管性血友病因子 (vWF)，血 管内皮细胞生长因子A(vEGFA)，血小板一内皮细胞黏附分子CD31的表达。根据资料不同采用One- wayANOVA检验、LSD法、Welch法、Dunnett’ST3法、f检验或相关f生分析。 结果 研究结果 显示 ：在BDL组中，与SHAM组相比，肝纤维化评分 (4．83±0．75对比0．O0士O．O0，P=0．000)、 胶原面积 (87．27士5．33对 比0．98±0．11，P=0．000)、免疫组织化学检测vWF的表达 (灰度值 3．1l±0．3对 比1．00士0．07，P=0．000)、VEGFA的表达 (灰度值8．38±I．64对 比I．00土0．08， 尸=0．003)、CD31的表 达 (灰度值 3．05±0．44对 比 1．00±0．12，尸=0．000)，Western blot检 测vWF的表达 (灰度值0．380土0．008对 比0．270±0．007，P=0．000)、VEGFA的表达 (灰度 值 0．270±0．005对 比0．120士0．002，尸=0．007)、CD31的表 达 (灰 度值 0．350±0．008对 比 0．O6O±0．004，P=0．000)均明显增高，差异有统计学意义 值均 0．01)；免疫荧光检测BDL 组肝组织vWF、VEGFA、CD31阳性表达细胞较SHAM 组明显增多。与BDL组相比，Ang(1—7)治 疗组 中肝纤维化评分 (2．50土0．55对比4．83土0．75，尸=0．000)、胶原面积 (24．46±3．45对比 87．27±5．33，P=0．000)、免疫组织化学检测vWF的表达 (灰度值 1．60±0．06对比3．11±0．30， P=0．000)、VEGFA的表达 (灰度值4．68±0．58对比8．38±1．64，尸=0．037)、CD31的表达 (灰 度值 1．42±0．12对比3．05±0．44，P=O．009)，Westernblot检测vWF的表达(灰度值0．190土0．007 对 比0．380土0．O08，P=0．000)、VEGFA的表 达 (灰 度值 0．120±0．006对 比0．270土0．005， 尸=0．000)、CD31的表达 (灰度值0．130±0．006对 比0．350土0．008，尸=0．000)均显著下降，差 异有统计学意义 值均0．01)；免疫荧光检测Ang(1—7)治疗组vwF、VEGFA、CD31阳性表达 的细胞较BDL组明显减少 ；各分组中VEGFA的表达与vWF表达呈现显著正相关关系 (，=0．956， P=0．000)。 结论 Ang(1—7)可抑制BDL诱导肝纤维化大鼠肝窦血管生成。 【关键词】 肝硬化 ； 肝窦血管生成 ； 血管紧张素 (1—7)； 血管内皮细胞生长因子A； 血管陛血友病因子 ； CD31 Inhibitoryeffectofangiotensin(1-7)OI1hepaticsinusoidangiogenesisinbileductHgation-inducedhepatic DOI：10．3760／cma