雷帕霉素联合抗CD34抗体复合支架置入后对血管内皮细胞功能早期影响地研究.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要…………………………………………．1 英文论著摘要…………………………………………．3 二、英文缩略语……………………………………………．5 三、论文 —1￡^—j一 刖舌…………………………………………………6 材料与方法……………………………………………6 实验结果……………………………………………．．9 讨论…………………………………………………12 结论…………………………………………………14 四、本研究的创新性的自我评价…………………………………15 五、参考文献………………………………………………16 六、附录 综述…………………………………………………19 致谢………………………………………………．．35 个人简介……………………………………………．．36 ·中文论著摘要· 雷帕霉素联合抗CD34抗体复合支架置入后对血管内 皮细胞功能早期影响的研究 刖 吾 药物洗脱支架(Drugdutingstent，DES)通过程序性的释放抗增殖药物有效的 抑制了支架置入后平滑肌细胞的过度增殖，显著降低了BMS置入后的支架内再狭 窄率。然而，由于抗增殖药物的毒性作用，DES在抑制内膜增生的同时，也造成 了血管“内皮化延迟”(delayed stent 导致支架内晚期血栓(1atethrombosis，LST)形成等致命的并发症。 近年来，为了克服支架置入后造成的血管内再狭窄缺点，很多新型支架被研 制并逐步应用于临床，包括无聚合物的药物支架，生物可降解支架，抗体捕获支 架等。其中药物联合抗体技术复合支架被认为是一个有效可行的新方向：在药物 洗脱支架抑制内膜过度增生的同时，在支架上涂覆抗体(CD34，CDl33，或者是 VEGFR．2等)，利用抗原抗体结合反应原理，迅速吸附与捕获外周血中的内皮前 体细胞，造血干细胞等到损伤血管局部位快速修复血管内皮，克服“内皮化延迟” 的难题。Granada等人的研究表明，药物联合生物捕获技术复合支架可以在有效预 防支架内再狭窄。 我们课题组将抗CD34抗体支架与药物洗脱支架相结合(国家自然基金项目 ，研制出雷帕霉素联合抗CD34抗体复合支架，实现了在抑制平滑肌细 胞过度增生的基础上，快速实现内皮化的目标，并在临床前的动物试验中取得了 满意的效。但是，这种新型支架对是否造成了内皮细胞功能障碍尚不明确，本研 究利用扫描电镜，免疫组化和WesternBlot等技术评价新型支架对血管内皮细胞 的早期影响。 材料与方法 组，采用国际上公认的小型猪冠状动脉过度扩张的再狭窄模型，分别置入雷帕霉 时处死全部动物，取支架段血管标本，制作电镜标本，以扫描电镜观察支架段血 管内皮细胞的形态，利用图形处理软件计算支架置入段血管再内皮化程度。小心 移除血管段支架，以免疫组化对eNOS进行定位分析，以WesternBlot来测定支架 段血管内皮细胞eNOS的表达程度，进行半定量分析，评估内皮细胞功能。 结 果 1结构完整性：支架置入后14天，电镜结果显示在SES—CD34+组与BMS组 86+8％， 均已基本完成内皮化(92-+3％LL P0．05)，但是SES—CD34+组内皮细胞形 态不规则，连接不紧密。 2功能完整性：支架置入后14天，免疫组化显示eNOS的表达在BMS组明 显高于SES．CD34组，WesternBlot显示eNOS在两组中均有表达，且eNOS的表 达在SES．CD34组明显下调，提示内皮细胞存在功能异常。 结论 本研究表明：新型的雷帕霉素联合抗CD34抗体复合支架能够实现支架置入 后的快速内皮化，但是结构完整性不等于功能完整性，支架置入后早期新生的内 皮细胞存在一定的功能障碍。 关键词 内皮化，CD34抗体，内皮细胞功能障碍，eNOS