第七章 分光光度法.ppt

(二) 酸碱离解常数的测定 1.原理： 某有机化合物的酸性官能团或碱性官能团是发色团的一部分，则该物质的吸收光谱随溶液 pH 值而改变，不同pH 时获得不同A。 HB ? H+ + B- (1) 配制三种分析浓度(c=[HB]+[B-])相等而pH不同的溶液。 2.测定方法 第一种溶液 pH在pKa附近，此时溶液中HB与B-共存，用1cm的吸收池在某一定的波长下，测量其吸光度： 第二种溶液 pH比pKa低两个以上单位的酸性溶液，此时弱酸几乎全部以HB型体存在，在上述波长下测得吸光度 第三种溶液 pH比pKa高两个以上单位的碱性溶液，此时弱酸几乎全部以B-型体存在，在上述波长下测得吸光度: 上式即为用分度法测定一元弱酸解离常数的基本公式。 A为式中所示的pH时溶液的吸光度。 推 导 将上各式整理得： （3）采用萃取光度法 用适当的有机溶剂萃取有色组分，如用丁二酮肟测定钯时，钯与丁二酮肟所形成的内络盐，可被氯仿从酸性溶液中选择性地萃取。许多干扰离子则不被萃取。 A. 在不同波长下测定两种显色配合物的吸光度,对它们进行同时测定。 B. 寻找新的显色反应 如将二元配合物改变为三元配合物。 C. 分离干扰离子 在没有适当掩蔽剂时，干扰离于可用电解法，淀法或离子交换法等分离除去。 D. 还可以通过选择适当的测量条件，消除干扰离子的影响。 (4) 其它方法 二、吸光光度法的测量误差及测量条件的选择 光度分析法的误差来源有两方面， (1) 是各种化学因素所引入的误差， (2) 是仪器精度不够，测量不准所引入的误差。 1. 仪器测量误差：是指在测量吸光度或透射比时所产生的误差。 任何光度计都有一定的测量误差。 (一) 仪器测量误差 2. 仪器测量误差的来源 仪器测量误差的来源是多方面的。 (1) 光源的发光强度不稳定。 (2)光电效应的非线性、电位计的非线性。 (3) 杂散光的影响、滤光片或单色器的质量差(谱带过宽)。 (4)比色皿的透光率不一致，透光率与吸光度的标尺不准等因素。 对给定的光度计来说，透光率或吸光度的读数的准确度是仪器精度的主要指标之一，也是衡量测定结果准确度的重要因素。 3.透射比的读数对浓度误差的影响 光度计主要仪器测量误差是表头透射比的读数误差。光度计的读数标尺上透射比T的刻度是均匀的，故透射比的读数误差?T(绝对误差)与T本身的大小无关，对于一台给定仪器它基本上是常数，一般在0.002~0.01之间，仅与仪器自身的精度有关。 读数误差?T(绝对误差)对?c/c的影响 根据郎伯-比尔定律： 两边微分： 将以上两式相除即得浓度测量的相对误差： 此式表明由相同的dT(?T)引起的dc/c(?c/c)是不相同的。 图10-8 |Er| -T关系图 假定某仪器的dT = ?0.005，按上式计算出T值不同时dc/c的绝对值|Er| ，并作出相应的|Er| -T关系曲线。 结论：当dT 一定，而被测组分分别处于低浓度范围(T大)和高低浓度范围(T小)时， ?c/c均较大，而且曲线有一最低点。 光度法的最佳测量范围 (1) 最佳测量范围：透射比在15%~70% 吸光度在0.15~0.80范围内。 由dT引起的|Er|较小。 (2) 当TlnT达最大值时， |Er|最小。 令 选择适当的测量条件，是获得准确测定结果的重要途径。 选择适合的测量条件，可从下列几个方面考虑。 （二）测量条件的选择 1. 测量波长的选择 由于有色物质对光有选择性吸收，为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，必须选择溶液最大吸收波长的入射光。 如果有干扰时，则选用灵敏度低一些，但能避兔干扰的入射光，也能获得比较满意的测定结果。 吸光度在0.15-0.80时，测量的准确度较高。为此可以从下列几方面想办法： (1) 计算而且控制试样的称出量，含量高时，少取样，或稀释试液；含量低时，可多取样，或萃取富集。 (2) 如果溶液已显色，则可通过改变比色皿的厚度来调节吸光度大小。 2. 吸光度范围的控制 3. 参比溶液的选择 参比溶液是用来调节仪器工作零点的，若参比溶液选得不适当，则对测量读数准确度的影响较大。 (1) 纯溶剂空白 选 择 办 法 当试液、试剂、显色剂均在测定波长处无吸收时，可用蒸馏水作参比液，称纯溶剂空白。 (2) 试液空白 试剂和显色剂均无色时，而样品溶液中其他离子有色时，应采用