17β-雌二醇对成骨细胞生成影响的实验分析.pdf

簦三羔鉴奎兰鍪杰塑!兰!塞————————————————一 17§。雌二酵对或嚣细胞生成影响酶实验研究 摘 要 为特征，致使骨强度降低、脆性增力H，易发生骨折的一种全身性骨骼疾病。臂质疏松醚 严重威胁人类健康，越来越引起人们的高度霪褪。对骨质疏松症的研究已经成为当鳆 医学界研究最活跃桶领域之一。甚箭金世界大约有2亿入惑骨质疏松症，其发病率已 跃居备种常见病的第七位。骨质疏松瘫在我因同样是一个严峻的公共卫生问鼷。 绝经后曹蓬丢失多，速度快，菅暇收帮静形成均增加，登高转换骨代谢。研究袭 明雌激素缺芝，成骨／基质细胞产生多种细胞因子如IL一6等增加，窀们刺激成骨细胞 (0t3)窝破臀细胞(Oc)生簸增多，弓|趋高转换骨代谢。憾磊前对绝经后裔转换骨代 谢发生的始动环节一成骨细胞生成增加的分予机理研究甚少。虽然每个骨再建循环都 蹩戮被嚣缎魏靛活纯为起点，毽戏曾细胞是嚣再建的中心环节，它不但直接参与曾形 成，而且还调节破骨细胞的分化成熟及活性，间接参与骨吸收。本研究从影响成骨纲 蕤生戏静因素入手，探讨雅激素对它们表达静影响，试图搦示罐激素对成曹细胞生成 的作用，阐明绝经后筒转换骨代谢产生的始动机理。 霉，l 髯蘧基矮筑稳曩裔多商分纯鲞嫠，受不同转录因予酌调节可分纯为藏骨缁胞、软骨 细胞、肌细胞和脂肪细胞。娥骨细胞的分化成熟受多种局部因子韵调节，其中以骨形 态发生蛋鑫受俸(BMPR)、薮磊否云享=■了磊ii万臻囊薛e军豳瘫增殖俸活侄受俸y 2(PpAR—v o 2)尤为重骚。Cbf 1是成骨细胞分化特异性转录因子，它活化成骨细胞 特异蘩罄懿髯撬蛋自、夤涎簧鑫、l鍪黢蒙黧曹钙豢鹃表达。PPAR-y2是瑟舫缩巍分 a 化的关键性转录因子，但它与Cbf relationsh匆，歪楚这舞“交互关系”决定麓嚣髓基质鳋稳熬努诧方两一成雷缡魏城 发挥黧要作用。 【爨熬】嚣髓基矮鳃戆峦i，25(穰)：魏黎遣塞寒松(DEX)静诱警下麓分讫为或餐 细胞。本课题研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的条件培养体系中，不同浓度17B g 一雌二簿(E2辩羹B醵PR-l、Cbf l秘PPAR-￥2鏊因表达豹影穗，攘讨雅二醇对残 骨细胞生成的作用，试图阐明绝经后商转换骨代谢发生始动环节的可能机制，为绝经 后高转换骨代谢鲍防浓及有铮对性药黪舞发提镤实验镦据。 【方法】取自3月龄雌性sD大鼠的骨髓黎质细胞钷生长培养基中培养传代后，用 vⅡ 第三军医丈学硕士研究生论文 blot给予涯 检溺BMPll一{矗，IB，Cbfgl粒PPAR-￥2mI{NA豹表达，莠溪Northern 实，以防PeR中存在假阳性{用Westernblot检测BlVlPR-IA和PPA肛y2鬣白的表达 4跨提。ALP黟l型默簸是残繁缨礁懿重要蠡悫貔，本实验选铎二袁{乍舞藏鸯维貔分绽 成熟的标志。ALP用化学酶法测定，I型胶原用VanGieson染色法嶷示。 【缝采】1．稚二浆麓弱羧撩割嚣蘧基矮缨瑰囱残鸯缓黪分绽过壤孛ALP涟牲，遮 着E2浓度的增加，ALP活性降低，呈剂量依赖性，在上述E2浓度时，ALP活性分别为 活性与E2浓度呈显著负相关(r一0．945，PO．01) 2。E2能糖制詈髓基覆缨戆蠢成臀缨魁分巅二过稷中鳃黪￡型黢原豹合成，隧藿E2 浓度的增加，I型胶原染色由鲜红、淡红、橙红到黄色，红色越深滚明I型胶原合成 越多，残嚣纲胞分化越残熟。 A 3．E2能明显抑锘4骨髓綦质细胞向成骨绷胞分化过程中BMPIt-Imt{NA及蛋白的 A 表达，随着嚣2浓度靛增加，BidPR-j 2．6)％，(17．O士1．8)％和(9．3±1．6)％(