拯救鸡传染性贫血突变株对宿主细胞生长周期及凋亡的影响.pdfVIP

中国展亏逸提 201l，27(26)：60—64 ChineseAgriculturalScienceBulletin 拯救鸡传染性贫血突变株对宿主细胞 生长周期及凋亡的影响 孙丹丹 ，杨 兵 ，史万玉 ，苏 霞。，满 坤 ， (河北农业大学动物科技学院，河北保定071001； 北京市农林科学院畜牧兽医研究所，北京 100097； 北京农学院动物科技术系，北京 102206) 摘 要：通过流式细胞术，观察拯救鸡传染性贫血病毒突变株(CIAVM突变株)对宿主细胞MSB1的生长 周期及凋亡的影响。拯救cIAV-M突变株接于MDCC—MSB1细胞系，并相应设立阴性组(正常SPF鸡肝 脏细胞液)，阳性组 (cux一1标准毒株)，进行培养24～48h。用PI及FITCAnnexinV染色方法，用流式细 胞仪测定宿主细胞生长周期及凋亡，并用SPSS13．0进行结果统计学分析。接种拯救CIAVM突变株的 宿 主 细胞 G0／G1期 的累积 细胞 百分 率 为 (59．33±4．o4)％，S期 为 (32．92土3．65)％，G2M／ 期 为 (7．75~3．11)％，与阴性组相比，G0／G1期细胞累积百分率有所上升；与CUX组相比，G0／G1期有所下降， 但结果经统计学分析，差异均不显著 ( 0．05)。试验组宿主细胞凋亡率为(37．00+4．65)％，与阴性组相 比，凋亡率上升，统计学差异显著 ( 0．05)；与阳性组相比，凋亡率下降，统计学差异显著( 0．05)。试 验结果显示，经过VP3基因突变的CIAVM突变株，经过病毒拯救并回归SPF鸡后，对宿主细胞MSB1的 生长周期没有显著的抑制，但能引起宿主细胞的显著性凋亡，且凋亡程度与cux一1引起的宿主细胞凋 亡率相比有所降低。可以表明，通过VP3密码子移位的基因突变，能够将CIAV的致凋亡作用降低 ，从 而相应降低病毒的致病性，为以后构建CIAV减毒疫苗株奠定理论基础。 关键词：拯救CIAvM突变株；宿主细胞MSB1；生长周期；凋亡 中图分类号：$858 文献标志码 ：A 论文编号：2011-0543 Ef1．ectofRescuedMutantCIAVontheHostCellCycleandApoptosis SunDandan。。，YangBing，ShiWanyu，SuXia2，ManKun (CollegeofAnimalScienceandTechnology,HebeiAgriculturalUniversity，BaodingHebei071001； qnztituteofAnimalScienceandVeterinaryMedicine，BengAcadem3ofAgricultureandForestrySciences，Beijing100097； CollegeofAnimalScienceandTechnology,BeqingUniversiyofAgriculture，Beijing102206) Abstract：ToobservetheeffectofrescuedmutantCIAVonthehostcellcycleandapoptosisofMDCC—MSBl throughflow cytometry．MDCC—MSB1wasinoculatedwithrescuedmutantCIAVM strainafter24—48h。while thenegativecontrolandthepositivecontrolwereestablished．CellcyclephaseandapoptosisofMSB1was detectedbyflowcytometry(FCM)withPIstainingandFITCAnnexinV staining．Theacquirementwas analyzedbyS