第五章致病微生物检验精品.ppt

致病菌检验参考菌群的选择 蛋及蛋制品：沙门氏菌、葡萄球菌、变形杆菌等 水产品海产品：链球菌、副溶血性弧菌 乳制品：沙门氏菌、志贺氏菌、葡萄球菌、链球菌、蜡样芽胞杆菌 畜禽肉类：肠道致病菌和致病性球菌 米面类：蜡样芽胞杆菌、变形杆菌、酵母霉菌等 罐头：耐热性芽胞杆菌、嗜热脂肪杆菌、大芽胞杆菌、凝结芽胞杆菌 　　大阪市政府５日宣布的调查结果显示，因食用日本雪印乳业公司大阪工厂生产的乳制品而中毒者已逾万人。 　　在大阪府和京都府以及附近６县，因食用雪印乳业公司大阪工厂生产的乳制品而中毒发病者已达１０６８２人，其中有１５５人被送往医院，目前还有３７人在医院接受治疗。 　　据化验，该工厂生产的一些乳制品中含有黄色葡萄球菌，这种细菌可产生使人出现腹泻、呕吐症状的Ａ型肠毒素。该厂乳制品染菌是生产设备没有按规定定期清洗而造成的。 　　目前，日本各地超市和食品店都已停止销售雪印牌乳制品，一些地方政府已下令禁止食用雪印牌食品。大阪雪印厂已被当地政府勒令无期限停产，并且大规模回收６月下旬出厂的几种染菌食品。 　　总部设在北海道首府札幌市的雪印乳业公司是日本著名乳制食品厂家。该公司在全国共拥有３５家工厂，其中２１家工厂加工生产牛奶、牛奶饮料、酸奶等奶品。 　　 媒体关于日本雪印牛奶金黄色葡萄球菌中毒事件的报道 日本因食用染菌乳制品中毒者已逾万人 (2000年7月6日12:39) 小结 个体与群体特征：兼性、球形、无鞭毛、无芽孢、G＋，污染食品后不易引起感观变化； 营养需求：水分、蛋白质、淀粉丰富的基质，但αw为0.85、18％的盐水中仍可生长，生长温度范围6.5~46℃，冰冻下可存活； 宿主与病症：主要宿主是人和动物，可引起胃肠炎； 预防措施：良好的个人卫生，最终灭菌温度应高于80℃、30min，减少加热后半成品积压时间。 培养特性 在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4。 平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。 金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。 生化特性 多数葡萄球菌菌株分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、产酸不产气，致病性葡萄球菌在厌氧条件下分解甘露醇、产酸，非致病性葡萄球菌无此作用。 甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。 许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。 金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。 致病力 金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血毒素：外毒素，分α、β、γ、δ四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。 d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温。 e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F五种血清型。 流行病学 季节分布，多见于春夏季； 中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。 上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。 肠毒素形成条件： 　　存放温度，在37°C内，温度越高，产毒时间越短； 　 　存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素； 　　 含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。 临床症状 潜伏期一般为1—6小时，最短者0.5小时即发病。 症状主要是恶心、呕吐、流涎，胃部不适或疼痛，继之腹泻(但少见)。呕吐为多发症，为喷射状呕吐，一般腹泻后多有腹痛，初为上腹部后成全腹部，呕吐或便中常可见有血和粘液。 少数患者有头痛、肌肉痛、心跳减弱、盗汗和虚脱现象。体温不高，不超过38~C，病程1天，呈急性经过，很少有死亡，预后良好。 微生物学定性检验 增菌培养法 方法：吸取5mL上述混悬液，接种于7.5%氯化钠肉汤或胰酪陈大豆肉汤50mL培养基内，置36±1℃温箱培养24h。 现象：在肉汤中呈混浊生长，在胰酪陈大豆肉汤内有时液体澄清，菌量多时呈混浊生长 。 7.5%氯化钠肉汤 成分 ：蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 氯化钠 75g 蒸馏水 1 000mL pH7.4 制法 ：将上述成分加热溶解,校正pH,分装试管,121℃高压灭菌15min。 胰酪胨大豆肉汤 成分：胰酪胨(或胰蛋白