苏云金杆菌质粒的快速分离及其在遗传改良上的应用.pdfVIP

苏云金杆菌质粒的快速分离及在遗传改良上的应用 摘要 摘要 对三种苏云金芽抱杆菌((Bacillusthuringiensis，简称Bt)质粒提取方 法的比较研究表明:SDS-NaCI法能稳定提取30Md的质粒，不利于60Md 质粒的提取:碱裂解盐中和法不仅能有效提取小质粒，对75Md的大质 粒提取效果稳定且收率高;胶内裂解法则能快速检测10Md的质粒。在 影响Bt质粒提取的多种因素中，原生质体的形成率是最主要因素。利用 Bt自发形成原生质体的特性，首次建立了一种快速分离 Bt质粒的新方 法，该方法提取质粒能获得清晰稳定的质粒谱。 石又寸Bt原生质体自发形成的研究表明:原生质体自发形成在Bt中具 有普遍性;培养基的组成和细菌的生长阶段和Bt的原生质体自发形成有 关，即只有在营养丰富的培养基上生长的处于对数期早期的培养物才能 自发形成原生质体;不同Bt菌株自发形成的原生质体形态不同，Btsubsp. thuringiensisHD-2,kurstakiHD-73和israelensis4Q5的原生质体仍保持 杆状，而kenyae-Ag7404和Bt9510则为球形。 检测