圆二色光谱-现代生物学仪器分析.pdfVIP

圆二色光谱圆二色光谱 ((CiCircullar didichhroiism specttroscopy)) 杜海宁杜海宁 梁毅梁毅 ((武汉大学生命科学学院武汉大学生命科学学院)) 手性与圆二色光谱手性与圆二色光谱 蛋白质、核酸和多糖等生物大分子都是手性分子 手性(chirality)：具有不能重叠的三维镜像对应异构体 凡具有手性的分子就具有旋光活性凡具有手性的分子就具有旋光活性 在上世纪六七十年代在上世纪六七十年代，，旋光色散和圆二色光谱成为研旋光色散和圆二色光谱成为研 究生物分子结构的有力手段之一 是测定蛋白质二级结构的有力手段之一 平面偏振光平面偏振光 振动方向在同一平面内振动方向在同一平面内 的电磁波为平面偏振光 振动方向保持不变振动方向保持不变 振幅发生周期性变化 旋光色散旋光色散 一束平面偏振光通过光学活性分子后，由于左、右圆 偏振光的折射率不同偏振光的折射率不同，，偏振面将旋转一定的角度偏振面将旋转一定的角度，，这这 种现象称为旋光(Optical rotation) ，偏振面旋转的角 度称为旋光度度称为旋光度 朝光源看，偏振面按顺时针方向旋转的，称为右旋， 用用 ““++”号表示号表示；；偏振面按逆时针方向旋转的偏振面按逆时针方向旋转的，，称为称为 左旋，用“-”号表示 圆偏振光圆偏振光 两束相互垂直两束相互垂直，，振幅相等的平面偏振光振幅相等的平面偏振光，，其位相相差其位相相差11//44波长时波长时，，其合其合 成矢量E 的末端轨迹沿着螺旋形旋转,如果对着光的传播方向观察，电场 矢量矢量EE 的末端轨迹为一圆的末端轨迹为一圆,这就是圆偏振光这就是圆偏振光 特点：振幅保持不变而方向周期变化，电场矢量绕传播方向螺旋前进 电场矢量方向按电场矢量方向按顺时针顺时针方向旋转的方向旋转的，，称为称为右圆偏振光右圆偏振光(d(dexttorattary ，，用用 符号d表示) 电场矢量方向按电场矢量方向按逆时针逆时针方向旋转的方向旋转的，，称为称为左圆偏振光左圆偏振光(levoratary ，，用符用符 号l表示) 椭圆偏振光 振幅相等的左、右圆偏振光合成平面 偏振光偏振光，，其振动方向由左其振动方向由左、、右圆偏振右圆偏振 光的位相决定( 图a和b) 振幅不等的左、右圆偏振光合成椭圆 偏振光偏振光(( 图图c和和d)) ，，椭圆偏振光常用主椭圆偏振光常用主 轴方向和椭圆度来表征它的特性 主轴方向即椭圆长轴的方向主轴方向即椭圆长轴的方向,是由左是由左、、 右圆偏振光的位相决定的 椭圆度或椭圆率是一个角度( 图中) ， 这个角度的正切是椭圆的短轴与长轴 之比 圆二色性 当一束平面偏振光通过介质时，光学活性分子对左、右 圆偏振光的吸收圆偏振光的吸收 和和 不同不同，，其差值其差值A = A – A 或或= L R L R  -  就是圆二色性 L R 摩尔消光系数表示的圆二色性：ε ε ε A A C l mol 1 cm 1 L R  L R     如果如果 -  00 ，，则则CDCD为为 ““＋＋””，，相应于正相应于正CCotttton效应效应；； L R 如果 -  0 ，则CD为“－”，相应于负Cotton效应 L R A 或均是波长的