茯砖茶中“金花”的生物学特性及其产消化酶活性的研究.pdf

茯砖茶中“金花菌的生物学特性及其 产消化酶活性的研究 摘要 最早的茯砖茶是明朝初年陕西茶商以陕南茶为原料筑制的一种紧压茶， 在其砖身内外生长繁殖一种金黄色的真菌，人们将此真菌俗称“金花菌”。 判断茯砖茶品质的好坏，人们通常根据“金花茵”的质量和数量来进行，以此 作为茯砖茶品质的评判标准。由于“金花菌”功能强大近几年来受到人们的关 注。本研究以陕西茯砖茶中提取的“金花菌为菌种，进行了“金花菌”的 生物学特性分析。通过优化试验，确定“金华菌的最适固体及液体培养条 件。在最适培养条件下，测定其产酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、 淀粉酶、脂肪酶的酶活。通过实验分析可知：金花菌有明显的产中性和碱性 蛋白酶酶活。进而对其产中性和碱性蛋白酶的培养基进行优化。本研究的实 验结果如下： a、从陕西茯砖茶中分离纯化得到一株“金花菌”，将其分别接种到马铃 薯琼脂培养基、改良察氏培养基(含5％NaCl)、察氏琼脂培养基、改良察 繁殖特征的观察，并通过ITS序列在分子水平上对菌株进行鉴定。得出结论 为：从陕西茯砖茶中分离出来的“金花菌的鉴定结果为冠突散囊菌。 b、以菌丝球干重为指标在基础液体发酵培养基上对冠突散囊菌的液体 发酵培养条件进行优化。①考察不同碳源：蔗糖、硝酸胺、尿素、蛋白胨、 酵母浸粉、大豆粉；碳源的不同含量：O．5％、l％、1．5％、2％、2．5％；不同 氮源：蔗糖、玉米粉、葡萄糖、乳糖、可溶性淀粉；氮源的不同含量：2％、 4％、6％、8％、10％对冠突散囊菌液体培养条件的优化，②考察接种量1％、 10r／min、 5％、10％，在250mL三角瓶中的装液量12％、16％、20％，转速1 最终确定最佳液体培养条件为：氮源为2．5％大豆粉、碳源为6％蔗糖、接种 在此条件下培养，冠突散囊菌的茵丝球干重可达到0．32％。 选取三种较佳的液体培养条件进行消化酶酶活的测定：条件A：接种量 均不产酸性蛋白酶和脂肪酶，产中性蛋白酶的酶活分别为5U／mL、4U／mL、 酶活分别为3IJ／mI，、5U／mL、7U／札。 C、以孢子数为指标对冠突散囊菌的发酵条件进行优化，在109麸皮上 的培养条件为：添水量为10mL，培养温度28℃，在此条件下冠突散囊菌的 产孢量可达到8．0×10葛个／g。 研究冠突散囊菌在基础固体培养基上产蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的活性， 研究结果表面：冠突散囊菌培养到第5天产淀粉酶的酶活可达到254．3U／g， 培养到第6天产脂肪酶的酶活可达到11．4U儋，培养到第7天产中性蛋白酶 产酸性蛋白酶为22．6U／g。研究结果表明该菌以产中性与碱性蛋白酶为主， 且在培养的第7d酶活均达到最大。添加不同碳源蔗糖、乳糖、麦芽糖、可 溶性淀粉、玉米粉；不同氮源硝酸胺、尿素、蛋白胨、酵母粉、大豆粉；无 突散囊菌产中性和碱性蛋白酶的培养基进行优化，研究结果表明：最适碳源 为乳糖、最适氮源为麸皮、最适无机盐为氯化钠。在此最适培养基下产中性 d、将冠突散囊菌液体发酵液进行大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌实 验，试验结果证明冠突散囊茵发酵液均对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有抑茵 作用。冠突散囊菌液体发酵液对大肠杆菌和金花色葡萄球菌抑菌直径分别为 12mm和10mm。 关键词：茯砖茶，“金花菌，冠突散囊菌，抑菌性，消化酶 n STUDYONBIOLOGICAL AND DIGESTIVEENZYMEACTIVITIESoF‘JINHUA， FUNGIFROMFUZHUANBIUCKTEA ABSTRACT The Was earliestFuzhuanBrickTeawhicha tea compressed insouthern Shaanxiin