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- 2016-01-27 发布于湖北
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酶免疫组化实验创新.ppt
酶免疫组化技术 微生物与免疫学教研室 实验目的 1、掌握免疫组化技术的基本原理。 2、掌握检测T细胞表面分子CD3的实验原理及检测方法。 3、掌握SABC免疫放大技术原理。 免疫组织化学技术(immunohistochemistry technique, IHCT)是指在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,借助可见的标记物,对抗原抗体进行定位、定性和定量检测的一种免疫检测方法。 抗原抗体反应的特异性 组织化学的可见性 分类 酶免疫组化技术 荧光免疫组化技术 亲和免疫细胞组化技术 免疫金(银)细胞染色组化技术 免疫标记电镜技术 杂交免疫细胞组化技术 酶免疫组化技术 酶免疫组化技术是直接以细胞或组织切片为抗原相,以酶联免疫技术检测抗原或抗体的存在与否或定位的一类酶免疫技术。 本实验以酶免疫组化技术检测CD3为例。以亲和素-生物素-过氧化物酶(ABC或SABC) 技术检测T淋巴细胞亚群为例验证酶免疫组织化学技术检测组织抗原的方法。 酶免疫组化染色中常用的酶及显示底物 最常用的酶是辣根过氧化物酶(HRP) 常用的供氢体: 二氨基联苯胺(DAB)—反应产物呈棕色 氨基乙基卡巴唑(AEC)—反应产物呈橘红色 4-氯-1-萘酚—反应产物呈灰蓝色 生物素-亲和素放大技术 是一种以生物素(biotin,B)和亲和素(avidin,
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