酶与细胞的固定化创新.pptVIP

固定化细胞类型： 生理状态 载体结合法 交联法 包埋法 载体活化的方法： 载体上的偶联功能基团：芳香氨基、羟基、羧甲基和氨基 酶分子功能基团：氨基、酚羟基、咪唑基、巯基、酚基和羟基等。 重氮法：将含有苯氨基的不溶性载体与亚硝酸反应，生成重氮盐衍生物，使载体引进了活泼的重氮基团。 迭氮法：含有酰肼基团的载体可用亚硝酸活化，生成迭氮化合物。 溴化氰法：含有羟基的载体，如纤维素、琼脂糖凝胶等，可以用溴化氰活化生成亚氨基碳酸衍生物。 烷化法：含羟基的载体可以用均三氯三嗪等多卤代物进行活化，形成含有卤素基团的活化载体。 优点：酶与载体结合牢固，稳定性好，不会轻易脱 落，可以连续使用。 缺点：反应条件苛刻，操作复杂，反应条件激烈，可能会破坏活性中心，催化效率低。 保护措施：1）选择适宜的固定方法和载体；2）严格控制反应条件，提高反应的专一性；3）应用可逆抑制剂或底物，封闭酶的活性中心。 交联反应可能发生在酶分子之间，也可能发生在分子内。 与酶的浓度与交联剂的浓度，也与pH和离子强度有关。 低酶浓度下主要形成分子内交联，保持溶解状态；高浓度下，分子间交联比例上升，变为不溶状态。 辅酶物质的固定化方法 辅基的固定化 载体共价偶联法：琼脂糖，纤维素及高分子载体等。 辅酶的固定化 载体共价偶联：溴化氰 辅酶的再生 辅酶和酶共固定的反应