利福霉素SV高菌株的选育.pdfVIP

摘要 mediterranei产生，在生物合成过 利福霉素SV由地中海拟无枝酸菌Amycolatoposis 程中受芳香族氨基酸、利福霉素芳香Iji『体C，N的结构类似物及利福霉素SV的反馈调节。 本文根据利福霉素SV生物合成途径和代谢调控理论，对利福霉素SV的产生菌进行了 mediterranei 174，作为两株不同 别得到Amycolatoposismediterranei49和Amycolatoposis 的诱变出发菌株。 选用不同的诱变剂对诱变出发菌株进行诱变处理，分别经过50#g／ml的吖啶黄诱变 处理、1％硫酸二乙酯(DES)处理16min、15W的uV照射60s、0．1mol／ml的HN02 mol／ml的 行药物耐受筛选，并结合自然选育进行分离纯化，经过琼脂块初筛以及摇瓶发酵复筛， 最终获得利福霉素SV生产菌株Amycolatoposis mediterranei49提高了18．5％。 6518#g／ml，较出发菌株Amycolatoposis 为了充分体现高产菌株Amycolatoposis 霉素SV的潜力，进一步对其发酵培养基进行了调整和优化。选取鱼粉、豆饼粉和KN03 三个因素进行单因素以及J下交试验，确定其发酵培养基的最佳组合是鱼粉的添加量为 菌株Amycolatoposis 培养基调整前提高了3．3％。 对利福霉素SV高产菌株Amycolatoposis 件下进行摇瓶发酵，分别测摇瓶发酵单位，其利福霉素SV发酵单位稳定在6300#g／ml 以上，说明利福霉素SV生产菌株Amycolatoposis 稳定性。 关键词：利福霉素SV：选育；复合诱变；吖啶黄；硫酸二乙酯；亚硝基胍 ABSTRACT SVis mediterranei．Theof RifamyeinproducedbyAmycolatoposis biosynthesis SVwasinhibitedthearomaticamino of aromatic rifamycin by acids，theanalogues precursor and tothe andmetabolic of SV C7N rifamycinSV．Accordingpathway regulationrifamycin of mediterraneil77rational was biosynthesis，improvementAmycolatoposis by screening toraisethe of SV．Strains mediterranei49 performed rifamycin production Amycolatoposis and mediterranei174were obtainedastwodifferentstrainsfor Amycolatoposis separately mutationfromthe strain mediterraneithemethods