可生物降解聚乙醇改性聚乳酸疫苗微球与纳米粒子载体研究.pdfVIP

蔓壅查兰竖主兰垡堡苎 ．—————————塑 摘要。 免疫接种是医学研究对人类健康的杰出贡献，也是最廉价的医疗手 段之一。不同年龄阶段的免疫接种，除了可有效预防各种疾病外，还能节 省整个社会的医疗费用。因疫苗抗原的物理化学与生物性能的特异性，以 毒副作用小、可生物降解的聚合物材料制备微球与纳米粒子载体控释投递 疫苗抗原与佐剂，在新一代疫苗研究中，具有十分重要的意义。 本文选用聚乙二醇改性聚乳酸为微球与纳米粒子载体材料，催化剂 改用ZnO／La20，(4：l，w／w)，母液回收再用，中间产物丙交酯的产率提 高近lO％；在聚乳酸与共聚物的合成过程中，得出了反应温度在140．160 ℃，反应时间24．72h，引发剂用量在0．01．0．04％范围为宣，且共聚物PELA 的分子量，随着PEG分子量的增大而增大，随投料比L肿EG减小而减 小，共聚物中乳酰基／乙氧基值与投料比LA／PEG基本一致。 提出了聚乳酸及共聚物回收再用技术，介质是影响丙交酯回收率最 重要的因素。在l。3M的HCl介质中，聚乳酸及共聚物回收较理想，其回 收率达65％以上。实验证实了PELA是比PLA亲水性、生物相容性好的 生物降解材料，是姗的嗡鳓龈轿嗡吲锘吁载黼样4。 应用W／O／W法％恪疫苗劫求副棚蜘参窖黝串，得出五因素对平均粒径与 成球性影响的主次顺序为： 乳化齑哝度一搅拌速率一聚合物浓度一dw黼H一内水相体积 乳临哳吲幽浓茛搅暾蟀、O／W，蝴、内水栅唰q彤擞巾、PELA共聚 物浓度、夕}水相电介质以及带峪积萌衢的体系温度等，是影响疫苗粒子的粒径与 分布掩趣；因素，i醢拙驱壕茹薅箭鼯拣粥韵影喻得出： 乳化剂PVA浓度f盱05％，难以排；莉励旺另—乳化齐岬磷脂，复}潲 粒臣曹剧下降其犍腑于0_3％商粒窿蚴；太外槲莆嚼溅度、电嘲荧等影 响疫药睦凇自包裹率、成粹以及稳定蛙．夕f水相中f氐子o．J％的NaO电孵贡 溶磁有种开例￡H啕、稳盖抬好、蛋白包露臻；i自c搬菇劫群鹚咪粒子：内水相 中翱K性的大，}子B-CD、PEG-2000、E目胶可1融啄瞄抗原蛋白，拓舒鲣张蚓屿 纳狗堂磁自包摹窜耘成弊以及，醒继性。 在疫苗微球载药释药实验中，探讨了工艺条件对释药曲线的影响， 运用计算机编程，提出PELA疫苗微球的释药通用方程为： 重盎奎兰塑主兰垡堡苎—————————————————!塑墨 a=1 零级释药方程 大部分疫苗微球释药方程 忡”{；n1 d=：l HiguchifJ程(d、部分疫苗微球释药方程) 建立PELA疫苗微球载药释药灰色数学模型，其计算结果可以预测 微球释药结果与释药时间。应用微球合适的工艺条件，制各了印口服微 球疫苗。采用CT技术，研究微球在动物体内的靶向分布，得出微球口服 cell，M细胞)摄取， 后首先被胃肠粘膜上皮细胞—微褶细胞(microfold 然后转运到深层PP：微球经口服免疫小鼠后，采用ELISA法检测血清、 唾液、肠粘液的抗体改变情况，EL[SPOT法分析PP结抗原特异性抗体形 成细胞(ASC)的数量增减。发现肋疫苗微球免疫后可诱导较高的唾液 s[gA水平和肠道sIgA反应，PP结抗原特异性抗体形成细胞(ASC)数量 与肠道slgA水平密切相关。 ＼，黼：可生挪獬，聚乙二l蛹卿塑爵嗡微曝肇椤f啦子 、 疫苗，灰台髟蒯 II 里垦查兰竖主兰垒堡兰 一—————』旦翌坠曼! ABSTRACT contributionofmedical Vaccinationthe mostimDressive single r