几种氨基甲酸类药与dna的相互作用.pdfVIP

摘要 摘要 DNA与农药小分子相互作用可能产生DNA加合物，从而引起DNA的损伤 甚至遗传信息的改变，因此，DNA与氨基甲酸酯类农药相互作用的研究具有重 要的意义。本文通过模拟人体生理环境，以溴化乙锭(EB)、中性红(NR)等 为光谱探针，运用荧光、紫外(UV)、核磁共振(NMR)、圆二色谱法(CD) 并结合DNA熔点实验、偏振实验、粘度和盐效应等体外实验研究了氨基甲酸酯 类农药抗蚜威、甲萘威、残杀威、灭害威和异丙威与小牛胸腺DNA的结合模式， 探讨了抗蚜威、甲萘威与DNA的结合反应各组分在平衡时的浓度变化及其对应 的纯光谱，为研究农药与DNA之间的结合方式与农药的致癌性和致突变性的相 关性，为揭示农药与DNA的相互作用机制以及为高效低毒农药研发和初步筛选 提供理论依据。主要研究内容和结果如下： (1)运用荧光、Uv和CD法对抗蚜威、甲萘威、残杀威、灭害威、异丙威 与DNA的相互作用进行了研究，结合r离子效应、DNA熔点及粘度测定等实验 进一步分析了这5种农药与DNA的相互作用模式。结果表明，这5种农药均通 过嵌插方式作用于DNA的亲核位点，意味着5种氨基甲酸酯类农药进入生物体 后有可能与DNA形成加合物，不同程度地造成DNA损伤。 (2)在pH=7．4的酸度条件下，运用荧光光谱法、DNA熔点及粘度测定等实 验手段分别探讨了Cu2+、Ca2+对抗蚜威、甲萘威、残杀威与DNA相互作用的影 响。结果表明：Ca2+、Cu2+的存在并没有改变抗蚜威、甲萘威、残杀威与DNA 的相互作用模式，但在不同程度上影响了农药与DNA的结合程度；Cu2+、Ca2+ 的存在，使抗蚜威-DNA、甲萘威-DINA、残杀威-DNA体系的熔点略有升高， 表明Cu2+、ca2+的存在加强了抗蚜威、甲萘威、残杀威与DNA的嵌插结合：Cu2+、 Ca2+存在时，抗蚜威、甲萘威、残杀威与DNA作用的相对粘度随着农药浓度的 增加而增大，这与农药_DNA二元体系的变化趋势相同，Cu2+、ca2+的分别存在， 并不影响抗蚜威、甲萘威、残杀威3种农药分别与DNA之间的作用方式(仍然 是嵌插作用)；Ca2+的存在对残杀威与DNA结合的影响较大且温度升高有利于 残杀威与DNA的相互作用。 ， 摘要 解析了抗蚜威、甲萘威与中性红竞争结合DNA位点的复杂光谱，获得了体系各 组分在平衡时的浓度变化趋势及其纯光谱，从而进一步证实了该2种农药与 DNA是以嵌插方式相结合。同时应用核磁共振技术(小心很)研究了与DNA结 合的甲萘威结构中的具体基团。 (4)探讨了25℃下5种氨基甲酸酯类农药与DNA的相互作用。计算出抗蚜 威、甲萘威、残杀威、灭害威和异丙威与小牛胸腺DNA和结合常数分别为 3．08×103、5．53×104、1．36×103、3．86×103和1．91×103L·mol-I，通过研究其相互作 用方式，发现农药与DNA的结合模式与农药的致癌、致突变作用具有一定的相 关性。当农药以嵌插方式与DNA发生作用时，很可能通过形成DNA加合物， 导致DNA的损伤，进而可能产生致癌性和致突变性。该研究为农药致癌性和致 突变性的初步评价和新型农药设计开发提供了新的途径。 关键词：DNA；氨基甲酸酯类农药；抗蚜威；甲萘威；残杀威；灭害威； 异丙威；荧光光谱法：紫外光谱法；圆二色谱法；核磁共振技术：熔点和粘度 测定；交替最小二乘(ALS)；平行因子：三致作用 n Abstract ABSTRACT to interactionswithsmallmoleculesof studies，DNA Accordingprevious DNA DNA oreven the pesticides adducts，causingdamage changes mayproduce