利用外植体组织养方法生产大豆异黄酮.pdfVIP

摘 要 摘 要r 针对目前我国异黄酮生产情况，探讨利用人豆不同外植体采剧组织培养的方式，来提取 大豆异黄酮，为今后生物反应器工厂化生产异黄酮是本研究的思路。针对栽培人豆，筛选最 佳外植体和最佳愈伤组织培养基配方：通过对野生大豆的综合分析评定，筛选叶片异黄酮含 量高的野生种。为外植体组织培养生产大豆异黄酮奠定前期‘fI：作基础。研究结果也初步表明， 这种生产大豆异黄酮新思路是可行的。本研究的主要结果如卜．： (1)东农42大豆幼苗光照培养30d时，根中人豆苗元及染料小素含鼍分别是，相应培 养时间无光照条件根中的3．69倍和3．59倍；在光照培养30d时真叶中大豆营元和染料木素的 含量仅次于根，此时是同时期无光照培养条件真n1’中，大豆曹元和染料木素的含萤的2倍。 不同外植体培养得到的愈伤组织中，真叶的愈伤组织培养60d时大豆营元及染料木素的含罐 培养的人豆幼苗中的，大豆苷元及染料木素含量高丁愈伤组织中的含域。人豆苛元及染料木 素总含量，较外植体中总含量增加最多的由真叶培养90d时外植体获得的愈伤组织，增加了 162。53倍和111．71倍。结合不同外植体诱导出的愈伤组织的重簧增长情况，在愈伤组织培养 90d时，根、子叶节、子叶作为外植体培养愈伤组织，生产大豆苜元及染料术素的效果最好。 合丰35在光照培养lO、20、30d时根中的大豆苷元和染料木素的含麓。分别是无光照培 20d时根中人豆苛元及染料木素的含量分别是，光照培养10d含簧的1．48倍和1．35倍，在光 照培养30d根中人豆苷元及染料／卜素含簧分别是，光照培养10d含晕的1．26倍利l，32倍。无 论光照培养与否，合丰35在培养10d时子叶和子叶。1，中，人豆苻元及染料术素含量都比培养 20d、30d子叶和子叶节中的含量高。 (2)针刺无菌苗下胚轴和针刺子叶外植体被侵染的比例较高，比例分别是0．61倍和O．40 倍。用端口涂液的方法更容易使下胚轴下部获得发根，大约有35条发根；在’卜．胚轴中部端口 涂抹发根农杆菌菌液的方法。获得的发根中大豆营元和染料术素含鼙较高。HjB5培养基培 养的发根重量最高，是最低重量的2．4倍。无论JH；|B5同体培养基还是州B5液体培养基都可 以使发根中大豆苷元及染料木素的含量增加。但是发根中残留在B5液体培养基中大豆营元 及染料木素的浓度较高，分别是浓度最低的1／2MS液体培养基的12倍和11倍。 (3)多年生野生大豆的生物学性状比较相似。多年生野生入豆叶片中人豆苷元及染料木 素的含量高的均为Glycinetabacina种，分别是大豆苷元和染料木素含鼙最低的Glycine Glycinefalcata种具有叶片火、茎粗、叶柄粗笛良好性状，可以作为高人豆苗元及染料小素含 量的多年生野生人豆资源进行研究，并提供了可行的生产方法。 关键词 火豆：大豆苷元；染料木素；农杆菌；多年生野生人豆 V 东北农业人学农学硕1j学位论文 Methodof Tissue to UsingExplantCulture ProductIsoflavon Soy es Abstract At inallusionto oflsoflavonesin onmethodof present production mycountry．Discuss using tissuecultureto distill the explant productsoyisoflavones，tolsoflavones，forfutureindustrial soy isoflavones isthereasonof allusionto and