乳酸菌拓扑异构gyrA基因突变与耐喹诺酮类药物的相关性.pdfVIP

摘 要 本研究是以内蒙古锡林郭勒牧区酸马奶中分离的23 株菌株为研究对象，首先， 通过形态学、生理生化鉴定、16S rRNA 序列分析，结果表明23 株试验菌株中，4 株 为Enterococcus raffinosus、3 株为Enterococcus durans、3 株为Enterococcus dispar 、2 株为 Lactobacillus plantarum 、2 株为 Enterococcus villorum 、2 株为 Enterococcus gallinarum 、1 株为Lactobacillus sake 、1 株为Lactobacillus casei 、1 株为Enterococcus pseudoavium ，4 株试验菌株不属于乳酸菌。 通过生理生化特性研究和抑菌特性研究，可以发现试验菌株生长温度范围广、具 有耐热性、耐酸性、耐盐性、部分菌株具有发酵二糖和分解淀粉的优良特性；并且对 Escherichia coli 、Enteritidis bacillus 有不同程度的抑制作用，菌株HZ1 、HZ15 、HZ24 、 HZ25 、HZ26 、HZ27 、HZ28 和NN1 对Staphylococcus aureus 也有不同程度的抑制作 用。 采用牛津杯法和试管两倍稀释法对19 株乳酸菌进行了耐药性测定，发现19 株乳 酸菌对诺氟沙星和环丙沙星具有不同程度的耐药性，耐药率高达100%，最高的MIC 值大于237.03μg/mL 。 试验通过对菌株DNA 拓扑异构酶ⅡgyrA 基因进行PCR 扩增、测序，与敏感性 大肠杆菌 gyrA 基因进行突变位点的比较，发现 10 株耐氟喹诺酮类抗菌药乳酸菌的 gyrA 基因位点发生突变，试验菌株HZ1 、HZ15 、HZ24 、HZ25 、NN 、NN1 、NN2 、 NN3 、ZB 和ZBQ 的gyrA 基因编码的氨基酸有 10 个位点发生突变，LD 有 11 个氨 基酸位点发生突变，HZ28 、BB 有 14 个氨基酸位点发生突变，证实试验菌株对喹诺 酮类抗菌药产生的耐药性与菌体DNA 拓扑异构酶ⅡgyrA 基因突变有直接关系。 关键词：乳酸菌；生物学特性；喹诺酮类；耐药性；gyrA Association of Mutation Patterns in GyrA Genes and Quinolone Resistance Levels in Lactic Acid Bacteria Abstract 23 strains were isolated from koumiss in Xilin Gol in Inner Mongolia, which were studied by the experiments on some aspects，such as morphology, physiological and biochemical characteristics, molecular biology. The results showed that there were 4 strains of Enterococcus raffinosus, 3 strains of Enterococcus durans, 3 strains of Enterococcus dispar, 2 strains of Lactobacillus plantarum , 2 strains of Enterococcus villorum, 2 strains of Enterococcus gallinarum, 1 strain of Lactobacillus sake, 1 strain of Lactobacillus casei, 1 strain of Enterococcus pseudoavium , 4 strains were not lactic acid bacteria. The characteristics of physiology and biochemistry and the inhibitory test were studi