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类受体激酶soir1互作蛋白的鉴定及功能分析
目 录
目录 IYIIIIIIl2IIIIIPl7Ullll7IJIIIl2lllJIl2IIIIIII鞘llll
摘亘
摘要…………………………………………………………………:.二二一-.一:●。V
英文摘要……………………………………………………………………………………..III
1前言…………………………………………………………………………………………1
1.1研究目的意义、研究内容、实验设计…………………………………………………1
1.1.1本研究的目的意义…………………………………………………………………1
1.1.2研究内容……………………………………………………………………………2
1.1.3试验设计……………………………………………………………………………2
1.2文献综述……………………………………………………………………………….3
1.2.1番茄抗叶霉病的研究进展………………………………………………………….3
1.2.2膜受体蛋白研究进展………………………………………………………………7
1.2.3SOBIRl研究进展…………………..…………………………………………….10
1
1.2.4互作蛋白鉴定方法的研究进展…………………………………………………一1
2材料与方法……………………………………………………………………………….15
5
2.1实验材料………………………………………………………………………………1
2.1.1植物材料………………………………………………………………………….15
2.1.2菌株和质粒………………………………………………………………………..15
2.2方法……………………………………………………………………………………………………………….15
5
2.2.1植物的无菌培养与栽培……………………………………………………………1
2.2.2载体构建的一般方法………………………………………………………………16
2.2.3各种植物表达载体的构建…………………………………………………………19
2.2.4酵母杂交筛选cDNA文库…………………………………………………………20
2.2.5转基因植物获得……………………………………………………………………22
2.2.6植物总蛋白的提取及免疫印迹共沉淀……………………………………………23
2.2.7质谱样品制备………………………………………………………………………24
2.2.8总RNA的提取…………………………………………………………………….24
2.2.9 fulvum接种测定……………………………………….25
HR检测和Cladosporium
2.3试剂及缓冲液配方……………………………………………………………………25
2.3.1常用分子生物学试剂配方…………………………………………………………25
2.3.2常用缓冲液配方……………………………………………………………………27
2.3.3常用培养基配方……………………………………………………………………28
3结果与分析……………………………………………………………………………….31
3.1SOBIRl蛋白序列分析…………………………………………………………………31
3.1.1
SOBIRl蛋白进化树分析………………………………………………………….3l
3.1.2SOBIRl蛋白结构域分析…………
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