棉花抗旱耐盐生指标的鉴定及抗旱耐盐相关cDNA片段的分离.pdfVIP

摘要 干旱、盐碱是全球面临的严重问题之一，也是制约我国农业生产的主要因素。新疆属于干旱荒 漠地带，气候干燥{盐渍地类型多，积盐重。同时新疆又是我国最大的棉花生产基地之一，开荒植 棉面积逐年扩大。棉花属于耗水作物。农业用水危机越来越突出。干旱和盐渍问题严重制约着新疆 棉花的进一步发展。多年来，人们采用传统常规选育等方法解决棉花品种干旱和盐渍问题，但往往 耗资大、工作量大和选择效率不高。随着分子生物学的不断发展，利用生物技术手段，培育抗旱、 reverse 耐盐棉花品种正成为可能。mRNA差异显示反转录PcR(differentialdisplay tr∞scriptionPcR，叻RT—PCR)技术为研究生物抗逆机制及通过克隆抗逆基因获得转基冈抗逆新品 系提供了技术支持，已成功分离出水稻抗盐、小麦春化、水稻抗稻瘟病等多种抗逆基因。 本研究以正常生长和逆境胁迫处理对120份棉花材料进行了抗旱耐盐性鉴定，并测定与抗旱耐 片段，并进行测序和序列分析。结果如下： l号为敏旱极盐敏感材料，C一和奎85一174为既抗旱又耐盐(双抗)棉花材料。 (2)分别在胁迫诱导前、胁迫后1．5小时、胁迫后3小时测定棉花体内各种生理指标，发现胁迫后 1．5小时变化量最大：多种指标的综合评价，所测的生理指标均在一定程度上反映棉花抗旱耐 盐生理变化。 二十种M”的十聚体随机引物，以上12个锚定引物和20个随机引物的240个组合进行盯一PcR， RT-PcR产物经6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染，共回收88条差异条带，二次扩增，选择出 41条表达稳定的差异条带，测序后进行同源性比对，与Genballl【中抗旱耐盐相关基因的同源性 大于85％序列7个，说明获得序列与抗旱耐盐相关性较大。 关键词：抗早：耐盐；生理指标；热硼酸蛋白酶K法；mRNA差异显示；聚丙烯酰胺凝胶电泳 II Abstract and is isalsotllc factorofilI Drou曲tsaltthe辩rio璐probl咖alloverme哪Id，whichiIIIportant jn a鲥culnl把ploducillgo叫∞删l廿yⅨiIl西i柚gbelon簪todlought锄d is∞cofthe co‰basic which kiIl萨ofheavy鞠n are舔，曲峙船lds are舔．Meanwllilc，xill商i锄gbiggest w鹋tclandand thecottonn∞ds waler a陀opencdup pl锄tedjllc他a∞，but lo协ofwater，tl”砸sisofusillg becoIms sah陀s仃ictme of iIl re|m血ably．【垧ught柚d i呷rovcmentcottoll讪styxiIl画i柚g．Forn瑚y sah yea塔，llleperso璐∞lve出eprobl咖ofdrought肌dby璐illg仃aditi鲫m出ecdjllgmetIlods，but“c∞ts fImch a deal isnot llIe n枷ey柚d鹏edsgreat of帅t盯，thee历ciencyof∞lec曲gbigII．Asbiological wm aIld铅ltbc developi