甲基化egcg酶法合成研究.pdfVIP

摘 要 甲基化EGCG是在茶叶中发现的一种特殊的儿茶素，它在抗过敏等方面表现出了比 率也比EGCG高，因而具有较大的药学价值和开发应用前景。然而，茶叶中甲基化EGCG 酶法合成或者化学合成等方法实现EGCG的甲基化修饰，进而大量制备甲基化EGCG，具 有重要的理论意义和应用价值。本研究的主要目的是通过重组DNA技术和发酵培养技术来 获得大量的D-甲基转移酶，并利用此酶进行酶促反应以获得甲基化EGCG，以期为今后甲 基化EGCG的酶法合成提供理论依据。主要研究结果如下： 1．对茶叶D．甲基转移酶在重组大肠杆菌内的诱导表达条件进行了优化，结果表明：诱导剂 时，诱导表达的茶叶D．甲基转移酶催化活性最高；并对粗酶液进行了分离纯化表明可用 EGCG3’qVle为386．39／cfg／mL， 和D环的丢失。 4．根据甲基化EGCG的断裂规律对酶促反应产物的质谱图进行分析，结果表明一共生成了 基化的EGCG。 关键词：甲基化EGCG，茶叶，口甲基转移酶，酶法合成 Abstract akindof catechinin effectthanEGCGin EGCG tea，has Methylated special stronger many suchas ismuch stablethanEGCGintheanimal EGCG more aspects antiallergic．Methylated itsoral rate of ithas valuein blood，and isalso thanthat EGCG，SO absorption higher great andhas infoodand field． promisingapplicationprospect beverageNevertheless， pharmacology contentof is littletea the tealeaves methylatedEGCG(mainlyEGCG3”Me)inverylow,andvery containsthan more 1％ofEGCG3”Meinitsleaves．itis difficulttoextract germplasm quite tea EGCG3”Mefromthe has theoretical and directly leaves．Therefore，it important significance valueto a dealof EGCG or applicationproducegreat methylatedthroughenzymaticsynthesis chemical methods．Theofthis is therecombinantDNA synthes