结球甘蓝抗tuv基因的aflp标记研究.pdfVIP

——』兰垫!!兰篷兰垒!兰塑主竺壅生堡墨：丝堡茎堇垫!!塑∑垒璺塑垒!曼里堑!垦塑塞 摘 要 oleraceaVaE 结球甘蓝(Brassica capitata)简称甘蓝，属于十字花科芸薹属，原产 于地中海沿岸，是世界上广泛种植的一种重要蔬菜作物。病毒病是甘蓝的一种重要 Mosaic 病害。TuMV(Turnip Virus)是甘蓝病毒病的主要毒原，主要靠蚜虫以非持 续性方式传播。采用化学药剂防治病毒病效果不明显，培育抗病品种是一种有效的 防治途径。传统育种在抗病性转育的过程中，需要人工接种后，根据表型用目测法 进行抗病性鉴定，存在费时费力、转育效率低、困鉴定的误差有时容易使目标性状 丢失等问题。 分子标记辅助选择(Marker-Assisted Selection，MAS)为在植物抗病育种中目标 性状的选择提供了一条快速有效的途径。AFLP标记因其具有多念性高、重复性好 等优点，在目标基因标记方面显示出』。泛的应用前景。 本研究以中国农业科学院蔬菜花卉研究所育成的甘蓝感病自交系01—16-5．7和 抗病自交系20．2—5及其配制的Fl代自交后构建的如代分离群体为试材。用侵染我 国甘蓝的TuMV主导致病株系——TuMV—c4对亲本和F2的各个单株进行室内人工接 种，利用酶联免疫吸附测定法对各植株TuMV的抗性进行鉴定。根掘鉴定结果采用 BSA法选取不同F2单株构建两对抗感池，应用AFLP分子标记技术筛选与甘蓝抗 TuMV基因连锁的分子标记，在分子水平上为甘蓝抗TuMV辅助育种提供一种快速 有效的方法。主要结果如下： (1)在温室隔离条件下进行苗期人工接种TuMV-C4株系，经过酶联免疫吸附检 测，F2代分离群体中抗病单株和感病单株的比例为3．10：1，对检测结果进行f适合 性检验，xC2=0．053x f1，0．05)2=3．84，证明其符合3：1的孟德尔遗传分离规律， 表明该群体中对TuMV的抗性受显性单基因控制。 (2)通过BSA法，从F2代分离群体中选用极端抗病和极端感病的不同单株构建 两对抗感池。应用AFLP技术，对与甘蓝抗TuMV基因连锁的AFLP标记进行了筛 选，以8个EcoRI引物，16个MseI引物，组成128个引物组合对抗感池进行筛选， 筛选出E2。M6l引物组合在两对抗感池中均出现一条相同差异带，其片断大小为 530bp，暂将浚标记命名为E24M61—530。 (3)用E24M6l引物组合对亲本、建池单株和其他的F2单株迸一步检测，并重复 三次，结果稳定。在所检测的172个F2群体单株中，只有23株发生交换，表明筛 Kosambi函数校正，其遗传距离为14．44cM。 AFLP分子标记 关键词：甘蓝TuMV 华中农业大学2004硕士研究生论文·鲒球甘蓝抗TuMV基因的AFLP标记研究 to AFLPMarkersLinked Mosaic Virus—Resistancein Turnie Gene oleracea Cabbage(Brassica vat,capitata) Abstract oleracea aworldwide Cabbage(Brassica Var．capitata)isvegetablecropbelonging the2Prassicaof it the