茶叶中二氢黄酮还原酶无色花青素还原酶性质研究.pdfVIP

摘要 儿茶素类是茶多酚的主体组分，是茶叶最重要的特征代谢成分，同时也是构成茶 叶品质的主要化学成分。 儿茶素合成途径中可能涉及的酶类有肉桂酸羧化酶(C4H)、4．香豆酰CoA连接酶 是黄酮类化合物合成下游途径中的重要酶类，在儿茶素合成途径中具有重要的调节作 单测定方法，较系统地研究了DFR／LAR的动力学性质，并探讨了不同部位茶鲜叶和 茶细胞系中儿茶素C和GC与DFR／LAR活性间的相关性。主要研究结果如下： 比色法分别对DFR／LAR酶促反应的产物无色花青素、儿茶素c和GC进行了鉴定。在 此基础上，建立了1％香草醛．盐酸比色法检测DF刚LAR酶活性的简便方法。 法。 率间的关系不表现为典型的米氏方程，存在底物抑制现象，经直接线性作图法得到两 mmol／L、 mmol／L、KNADPH．DHM=0．925 种底物的四个表观米氏常数为KNADPH-DHo_O．888 mmol／L。研究结果还显示，4mmol／L mmol／L、KDHM．NADPH=I．145 KDHQ-NADpH=0．337 SDS对DRF／LAR的活性有一定提高；EDTA在01mmol／L范围 M92+、100mmol／L 内对DRF／LAR活性有极强的抑制作用，而Fe3+在0～1mmol／L范围内对DRF／LAR 活性有一定的抑制作用。 4．对不同部位茶鲜叶与茶细胞系云茎63中的总儿茶素含量、儿茶素C和没食子 儿茶素GC含量、DRF／LAR酶活性进行了测定，结果表明，无论茶鲜叶还是细胞系， DRF／LAR 酶活性逐步下降，儿茶素GC的含量与DRF／LARDHM酶活性呈正相关性。 关键词：茶；二氢黄酮醇还原酶／无色花青素还原酶；酶学性质 Abstract oftea not themost Catechins，the polyphenol，areonly principalcomponents in characteristic tea alsothemainchemical important metabolizingcomponentsplant，but oftea componentsquality． Some relatedtothe ofcatechins includecinnamate enzymes procedure biosynthesis 4-hydroxylase(C4I-D，4一coumaroyl—CoAligase(4CL)，chalcone SOon． reductase(LAR)，anthocyanidinreductase(ANR)and (DFR)，leucoanthocyanidin is inflavone andhave DFR／LAR veryimportantenzymes biosynthesispathway significant functionincatechin determinationofDFR／LAR was regulating biosynthesis．The activity establishedandthekinetics