茶叶中的脂肪酸其对脉络膜-视网膜RF6A内皮细胞生长的影响.pdfVIP

摘要 长链脂肪酸的生理功能己得到广泛认识，特别是人体必需脂肪酸亚油酸和亚 麻酸对健康的保健功效已被现代医学证实。据流行病学调查，细胞和动物实验研 究证实，u一3系列脂肪酸有利于视网膜的发育及其功能，如DHA被认为对视网 膜有保护作用，一旦缺乏会严重影响视觉功能。同时，脂质过度积累也会影响视 觉功能。糖尿病性视网膜病变是由糖尿病引发的眼部并发症，脂质异常通常被认 为是引发这类视网膜病变的一个危险因素。 但是茶叶中的脂肪酸对人体视功能发育的影响迄今鲜有研究。我国宋朝以前 的饮茶方式，可谓“吃茶”。古书多有“茶能明目”的记载，现代医学研究表明， 茶叶中含有的活性成分如维生素A原(胡萝卜素)、维生素B1、B2、C等，都 是维持正常视功能不可或缺的物质。探讨茶叶中的脂肪酸，是否与视网膜健康相 关，正是论文研究的目的。 本文利用气相色谱法对茶树鲜叶不同叶位中脂肪酸的组成进行了测定和分 析，结果表明茶叶的脂肪酸组成主要为长链脂肪酸，其中，以棕榈酸(C16：O) 和亚油酸(C16：2)、亚麻酸(C18：3)为主。槠叶齐品种茶叶中亚油酸和亚麻 酸的含量占脂肪酸总量的49．0--65．2％，含量最高的第二叶为3．16毫克／克鲜叶， 其中亚油酸1．25毫克／克鲜叶，亚麻酸1．91毫克／克鲜叶；采用恒河猴脉络膜视网 choroids-retinalendothelial 膜内皮细胞(Rhesur cells，RF／6A)培养体系 macaqud 研究了棕榈酸、亚油酸、亚麻酸三种长链脂肪酸对视网膜内皮细胞生长的影响， 通过研究亚油酸对自由基的清除作用及其对脂质体中氧消耗的分析，探讨了不饱 和脂肪酸与视网膜脂质过氧化之间的关系。 MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测不同浓度脂肪酸单体作用不同时间对RF／6A 细胞活力的影响，结果发现，不同结构的三种长链脂肪酸在低浓度时对细胞的影 响有差异。小于400uM棕榈酸对细胞存活率影响不大，u一6系列亚油酸和u一3 u 系列亚麻酸对细胞生长有促进作用，其中，40．200M亚麻酸处理细胞24小时 使细胞增殖达到极显著差异。同时，三种脂肪酸在较高浓度下可抑制细胞活力。 500u 1-t M棕榈酸、400M亚油酸、300BM亚麻酸分别处理细胞不同时间(12， 24，36，46小时)后能显著降低存活率。 琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA条带，结果表明，不同浓度的三种脂肪酸处 理细胞24小时和48小时，均未检测到梯型条带；流式细胞仪测定结果也发现， 三种脂肪酸均未诱导细胞凋亡。倒置显微镜观察结果，400uM亚油酸和300u M亚麻酸处理，可致细胞悬浮，但并未诱导细胞凋亡或杀死细胞：ESR分析表 明，亚油酸具有清除DPPH·自由基的功能，且在乙醇溶液体系和脂质体中相似。 PC中加入0．05M EggPc质脂体研究亚油酸对脂质过氧化作用，结果发现在Egg 亚油酸后氧消耗水平低于EggPC对照组。由此推断，具有长链多不饱和结构的 亚油酸对上述体系具有抗氧化作用。亚油酸处理有可能参与对视网膜内氧化还原 水平的调节。 关键词：长链脂肪酸；糖尿病性视网膜病变；细胞存活率；凋亡；自由基 ESR：脂质过氧化 4 ABSTRACT Therehasbeenmuchfocus onthe chain were recentlylong fattyacids，which consideredasa determinantof andneural major growth，visual development． studiesand clinicaldata