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马铃薯l-半乳-1，4-内酯脱氢酶基因在番茄中的功能分析
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中文摘要………………………………………………………………………………1
1．1高等植物中AsA的生物合成……………………………………………。5
1．2
AsA在植物体内的氧化还原过程………………………………………8
1．3植物体内心A的降解…………………………………………………9
1．4植物中AsA的转运……………………………………………………………9
1．5AsA在植物体内的生理功能………………………………………………．12
1．6L．半乳糖．1，4．内酯脱氢酶(GalLDH)研究进展…………………………19
1．7本研究的目的意义……………………………………………………………．22
2材料与方法……………………………………………………………24
2．1试验材料…………………………………………………………………．24
2．1．1转基因植物材料………………………………………………………………24
2．1．2温度胁迫处理的材料………………………………………………24
2．1．3载体和菌株…………。………………………………………………24
2．1．4所用培养基……………………………………………………………24
2．1．5
PCR所用引物……………………………………………………………24
2．2．1转基因再生番茄植株的获得…………………………………………一24
2．2．2转基因番茄PCR和荧光定量PCR检测……………………………25
2．2．3筛选抗性T1代植株……………………………………………………．．27
2．2．4番茄叶片和果实中抗氧化物质的含量和有关酶活性的测定………27
l
3结果与分析………………………………………………………………3
3．1高低温胁迫对番茄叶片抗坏血酸代谢系统的影响…………………．31
1
3．1．2温度胁迫下GalLDH活性………………………………………………32
3．1．3温度胁迫下APX活性…………………………………………………。32
3．1．5温度胁迫下GR活性…………………………………………………．．33
3．1．6温度胁迫下H202含量……………………………………………………。33
3．2马铃薯L．半乳糖．1，4内酯脱氢酶基因在番茄中的表达效应
…………………………………………………………………………………………………………………………34
3．2．1转基因番茄植株的分子检测………………………………………34
3．2．2
T1代转反义基因番茄植株的PCR检测……………………………．．35
3．2．3
T1代转反义基因番茄植株的荧光定量PCR检测…………………36
As～DHA的影响……………………………………………………………………38
3．2．9转GalLDH反义基因对番茄GR活性的影响…………………………42
3．2．10转GalLDH反义基因对番茄叶绿素和光合作用的影响…………．42
3．2．11转GalLDH反义基因对番茄株高和茎粗的影响…………………43
3．2．12转GalLDH反义基因对番茄果实糖、酸的影响………………………44
4讨论…………………………………………………………………………。44
4．2
4．3
4．4GalLDH反义基因对番茄相关酶活性的影响…………………………46
4．5GalLDH反义基因对番茄谷胱甘肽系统的影响………………………46
4．6GalLDH反义基因对番茄糖和酸的影响……………………………。48
5结论……………………………………………………………………………………………………49
参考文献………………………………………………………………………49
附勇乏…………………………………………………………………………………………………………………62
致{射……………………………………………………………………………………………………………64
攻读学位期间发表论文情况…………………………………………………65
II
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