黄瓜重要抗病基的分子标记研究及遗传图谱的构建.pdfVIP

摘 要 黄瓜是全球普遍栽培的主要蔬菜作物，其栽培面积在我国保护地蔬菜中居首位，对保证我国 蔬菜周年均衡供应方面具有十分重要的作用。目前黄瓜的分子生物学研究基础比较薄弱，这一方 面给黄瓜分子遗传的研究造成困难，另一方面也为我国在分子生物学的研究进入世界研究前沿带 来了机遇。因此，开展黄瓜的分子育种研究具有重要的理论和应用意义。 建立分子标记辅助育种技术系统并构建饱和通用的黄瓜遗传图谱是开展黄瓜分子育种研究 的基础。黄瓜的重要经济性状较多，其中抗病性尤为重要，但抗病性的鉴定在技术上较为复杂， 易受环境、菌种质量、操作水平等影响，特别是多种病害的同时鉴定，更有许多技术上的问题有 待解决。因此，建立黄瓜抗病性分子标记辅助育种技术系统是首选研究课题。黄瓜分子遗传图谱 构建的研究已经取得了重要进展，但是己构建的图谱多数是以F2为作图群体的临时图谱，并且图 谱的饱和度均不高，采用的作图群体和分子标记各异，缺乏通用性和实用性。因此，采用永久作 图群体构建饱和通用的黄瓜遗传图谱是当前需要解决的问题。 本项研究从当前黄瓜分子生物学研究的现状、育种的需求以及我们已有的工作基础出发，确 定以建立黄瓜抗病性分子标记辅助育种系统为切入点，首先开展五种主要病害抗性基因连锁分子 标记研究：与此同时，以RIL群体为材料构建黄瓜分子遗传图谱，逐步对重要性状进行基因定位， 并且开始筛选用于图谱整合的SSR锚定标记，为最终通过图谱整合策略，构建高密度、通用性和 实用性强的黄瓜栽培种分子遗传图谱打好基础。 本项研究取得如下主要结果： 1． 利用黄瓜重组白交系群体和2个F2分离群体，对五种主要病害的抗性遗传规律进行了研 究。结果表明：黄瓜抗病材料“秋棚”对小西葫芦黄化花叶病毒(ZYMV-CH)，番木瓜环斑病 也存在微效基因的修饰作用，同时，三种病毒病的抗性基因存在紧密连锁关系；抗病材料 “WIS2757”对枯萎病生理小种4的抗性由一对显性基因控制，对自粉病的抗性符合一对隐性主 基因J，一对显性加强基因R和一对抑制基因，控制的遗传模式。 2． 利用上述材料，对五种主要病害的分子标记进行了较系统的研究，并建立了抗病毒病的 分子标记辅助育种系统。 D标记AU3-400、 2cM和9cM。 3)获得与PRSV-W感病基因连锁的RAPD标记AP7—1800，连锁距离为3cM。 和RAPD标记OPD9．300，连锁距离分别为7cM、7cM和14cM。 记PMSCAR．300，连锁距离均为7cM。 6)应用上述连锁标记，初步建立了抗病毒病的分子标记辅助育种系统。利用单个分子标记 进行辅助选择，三种病毒病分子标记检测结果与表型鉴定的符合率为82％-90％；利用两 侧标记进行辅助选择，符合率达到95’缸100％。 3． 利用(欷棚x欧洲八号)的黄瓜重组自交系为作图群体，构建了我国第一张黄瓜分子遗 为727．5cM。标记平均间隔3．1cM。这是目前国内密度最大的黄瓜栽培种永久分子遗传图谱。由 于作图群体为世界上应用最广的欧洲温室生态型和华北露地型黄瓜的杂交后代，该图谱具有较好 的代表性，可以作为基本图谱与其他图谱进行整合，构建高密度、代表性和通用性更好的黄瓜分 子遗传图谱。 4． 传图谱上的同时定位是国内外首次报道。 5． 利用上述黄瓜重组自交系群体和2个Fz分离群体，对适于图谱整合的锚定SSR标记进行 了筛选，获得了在亲本间有多态性的SSR引物近20个和能够直接用于图谱整合的SSR标记3个， 但还不足以用来进行图谱整合，今后嚣要继续寻找更多的锚定分子标记。 关键词黄瓜，抗病性，分子标记，遗传图谱 Abstract cultivated is cultivatedinthe Cucumberis crop．InChina,it globallywidely vegetable mainly inc