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- 2017-08-19 发布于安徽
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三、阻遏蛋白与操作子的相互作用 (一)操作子上与阻遏蛋白结合的位点 1,lacI基因的表达特点 2,lac操作子(lacO)与阻遏蛋白的结合 (1)阻遏蛋白与lacO结合的实验证据 (2)lacO与阻遏蛋白结合的位点及其结构 A,DNA内切核酸酶消化实验证明:受阻遏蛋白保护区域位于-5 ~ +21(26bp) B,阻遏蛋白保护位点 C,lacO 的结构及其与阻遏蛋白的结合性质 3,阻遏蛋白对RNA聚合酶功能的影响 (1)阻遏蛋白和RNA聚合酶可同时与DNA结合 (2)阻遏蛋白与DNA的结合能增强RNA聚合酶结合启动子的能力(RNA聚合酶与的平衡常数从1.9*107增加到2.5*109) (3)阻遏蛋白有效地使RNA聚合酶与lac启动子上形成一个很强的关闭式的转录起始复合物,阻止转录的起始 (4)阻遏蛋白的这种作用对操纵元的诱导也有促进意 4,上述模式不一定适用于其他系 (二)阻遏蛋白上与操作子结合的位点 1,阻遏蛋白单体的结构 (1)长头片段(long headpiece) (2)短头片段 (3)核心片段(core) (4)铰链区 2,阻遏蛋白四聚体的结构 3,阻遏蛋白与操作子的结合 4,阻遏蛋白需要组成四聚体才能实现完全的阻遏作用 (1) lac系统存在多个操作子 (2)阻遏蛋白四聚体可以同时与两个操作子结合 (3)阻遏蛋白结合第二个操作子影响阻遏的水平 (三)阻遏蛋白与操作子的
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