染色体易位携带者植入前遗传学诊断体系的建立和应用.pdf

摘要 目的：(1)以单细胞细菌人工染色体一荧光原位杂交(bacterial artificial in chromosome-Fluorescentsitu genetic 体系应用于临床。 方法：(1)从遗传咨询门诊中筛选一例经G显带证实为染色体 外受精／单精子卵胞浆内注射(in-vitro sperm 核型选择合适的BAC克隆，自制BAC探针，用正常人及该携带者的 外周血淋巴细胞、我室建株淋巴细胞行预实验。然后，对染色体核型 的诊断体系，对4例染色体易位携带者夫妇，分别行1个PGD周期， 结果：(I)体系建立中，所选BAC探针在外周血淋巴细胞间期 核的平均杂交效率为95．9％，特异性为100％。建株淋巴细胞固定中， 酸(Tween-20／HCL+Mcthanol：Aceticacid，n{+MA)法固定，3．1％ 的细胞见2个核。共获得捐献卵裂球细胞205个，205个用于固定， 见核碎片，26．8％(55，205)的细胞未见核。97个卵裂球细胞用于杂 易位携带者PGD结果表明，病例l、病例2、病例4分别有1个、1 个、4个胚胎未见异常，病例3的2个胚胎无法诊断。病例l、2、3、 4分别移植1个、1个、2个、3个胚胎，其中病例l、2、3均未妊娠， 病例4已获临床妊娠，目前正在妊娠中。 结论：(1)以单细胞BAC．FISH为核心技术建立了染色体易位携 带者PGD体系。(2)建立的染色体易位携带者PGD体系，相对于目 前国内所用的2个商业化端粒探针行染色体易位携带者PGD更经济、 准确。(3)应用该体系已成功使一例13、14号染色体相互易位携带 者妊娠。(4)该体系为其他染色体异常的PGD奠定了基础，将为更 多的染色体异常患者及家庭提供更全面的PGD。 关键词染色体易位携带者，PGD，单细胞BAC-FISH Ⅱ ABSTRACT establishapreimplantationgenetic Objective：(1)To forchromosometramslocationcarrier BAC-FISH system bysingle-cell in (bacterialartificialchromosome．Fluorescentsitu hybridization， thePGD toclinic BAC-FISH)．(2)Applysystem practice． achromosometranslocation was Method：(1)Choose carrier,who confLrmedalcaryotypo Gbanding．He of46，XY，t0：12Xq32：q13)by to neededtheIVF／ICSIanddesired tothe acceptPGD．According clones carrier’s chosesuitableBAC andmadethe karyotype，we Was in BAC-probes．Thenpreliminaryexperi