大连地区汉族人群HLA-DRB1等位基因多态性分析研究.pdf

独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作 及取得的研究成果。据我所知，除了文中特,另tlDn以标注和致谢的地方 外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为 获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与 我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的 说明并表示谢意。 学位论文作者签名：壹l至垒 签字日期：a丝翌年上月支日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保 留、使用学位论文的规定，同意大连医科大学保留并向国家有关部 门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借 阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编 入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保 存、汇编学位论文。 论文作者签名： 鱼：!趁 指导教师签名： 豸过 签字日期：逊年舅五日 大连地区汉族人群HLA．DRBl等位基因多态性研究 硕士研究生：刘豪杰 指导教师：徐 飞 教授 专业名称：人体解剖与组织胚胎学 摘 要 目的：HLA(人类白细胞抗原，humanleukocyteantigen)是人类主要组 织相容性复合体(MHC，major histocompatibilitycomplex)，是位子人类第6 号染色体短臂上的2区l带的具有多基因性与多态性的紧密连锁的基 基因位点，有功能的基因占128个。HLA是迄今所知最复杂的一个人类 遗传多态性系统。不同种族，同一种族的不同民族，甚至同一民族在不同 地理环境中HLA参数不尽相同，因此HLA的多态性有人种差异。目前 HLA的应用已从器官移植的组织配型检测扩展到与疾病的关联、亲子鉴 定、免疫应答、人类学、某些先天遗传病的早期诊断及未来基因治疗等领 域。本研究旨在通过对3387名大连地区汉族健康人群HLA．DRB座位上 的等位基因进行分型，建立大连地区人群的HLA分型数据库，从而为患 者提供HLA配型尽可能相合的供者；通过计算、与有关文献报道比较分 析得出大连地区汉族人群的HLA等位基因分布特点，为亲子鉴定及人类 学研究提供理论依据；同时由于HLA多态性的差异可决定个体免疫应答 的不同，一个地区正常人群的HLA基因研究资料也必将为HLA基因与疾 病关系的研究发挥重大作用。 方法：选取大连地区汉族志愿捐献骨髓的献血者3387名，身体健康， 体检标准符合“全国采供血管理规范。家族无遗传病史，年龄在l8—55周 岁，均无血缘关系。留取3387名个体外周静脉血3～5ml，EDTA抗凝， l00IS 分析系统进行全自动化结果判读和基因分析。在SSO技术基础上采用流 式细胞技术，将标记有生物素的序列特异性引物，扩增HLA等基因座位， 扩增产物与标记荧光的寡核苷酸探针进行杂交冲洗后，在Luminexl00流 式细胞仪上进行判读结果。当扩增的DNA片段与探针结合并发出荧光为 阳性，否则为阴性。HLA．DRBl的各等位基因的基因频率和基因型频率采 用直接计数法。与其他国家和地区间的等位基因频率分布的比较应用遗传 学分析软件Arlequin(3．1l版本)。 结果：1．等位基因、基因型和等位基因频率：本研究检测的大连地区 3 1位点中，共检测到HLA—DRBl等位基因1 汉族3387人的HLA．DRB