MSI-H%2fS结直肠癌差异表达分子的筛选和其在免疫治疗中的意义.pdf

目录 中文摘要………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………10 缩略词表………………………………………………………………18 前日IJ 言………………………………………………………………19舌“…………………………“………………………………一19 第一部分MSI．H／S结直肠癌细胞模型的建立……………………………21 第二部分 MSI．H／S结直肠癌细胞模型中差异表达分子的筛选及验证……34 第三部分 MSI．I-I／S结直肠癌免疫治疗预后相关机制探讨………………53 第四部分不同微卫星状态下肿瘤抗原表达差异的验证及对于结直肠癌患者 预后的影响…………………………………………………70 总 OiO0……………………………………… 结………………ii 82 参考文献…………………………………………………………… 84 综 述…·………………………………………………………．． 88 致{射……………………………………………………………103 MSI．I-I／S结直肠癌差异表达分子的筛选及其在免疫治疗中的意义 摘要 结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一，全世界范围内结直肠癌的发病率，在男性 及女性中分别处于恶性实体肿瘤的第3位和第2位【1】。最新研究表明2012年美国结 直肠癌新发展病例数和死亡率均居第3位【2】。由于结直肠癌发病隐匿，初次就诊 的患者近30％发现肿瘤转移，目前对于转移性结直肠癌的患者，化疗仍然是这部 分患者的主要治疗手段，但由于肿瘤患者的个体差异性及不同患者的肿瘤异质 性，尤其是近年来肿瘤细胞耐药现象的不断出现，使得结直肠癌的预后疗效并不 显著。因此，如何提高结直肠癌患者的临床疗效一直是肿瘤治疗领域的核心问题 之一。分析肿瘤患者预后的相关生物学标志物，探索对某种治疗方式敏感患者的 共同特征，对不同患者采用不同的治疗方式，即肿瘤的个性化治疗，对提高结直 肠癌患者的临床疗效，具有重大意义。目前治疗的个性化已成为目前肿瘤治疗学 的一个新的特征与发展方向【3】。 微卫星不稳定性(Microsatellite 之一【41，MSI作为结直肠癌的预后标志的研究，日益受到关注嵋1。研究发现高频 microsatellite 微卫星不稳定(High．frequency microsatellite 其与低频微卫星不稳定(Low-frequency 型(Microsatellite stability，MSS)的相比，病理特点主要是肿瘤多位于近端结肠、 黏液腺癌多见、分化较差，但却有相对较好的预后【6西】。对于这类MSI．H特殊的结 直肠癌患者深入研究后发现，其体内由于处于基因外显子区域的微卫星序列反复 突变，进而引起蛋白质的读框突变，最终导致机体产生异常的多肽片段，这些异 常多肽片段更易激发机体的抗肿瘤免疫应答反应[10-131。研究还发现，其肿瘤微环 境中免疫相关的调控因素更有利激发免疫系统，进而促进了免疫系统功能发挥 临床研究中，对部分临床样本进行了微卫星状态的分析，在初步筛选出的18例 解(Partial response，PR)，2N为轻微缓解(Minimal 月，而对照组(单独化疗)8例MSI．H的患者仅为2PR，2NC，4PD，PFS为2．7 月，结果也提示：接受树突状细胞治疗性疫苗组中的MSI．H的结直肠癌患者可能 第二军医大学博士学位论文 获得高于单独接受化疗的临床疗效。这些都提示了MSI．H这类特殊的肿瘤患者可 能由于其肿瘤本身的免疫原性更强，其体内的免疫系统中各种调节因素的共同作 用，最终改善了其预后。 但现阶段由于缺乏有效的MSI结直肠癌细胞及动物模型，使得目前国际上 大部分对于MSI．H结直肠癌的免疫学特性及其治疗的研究只是局限在临床样本 的研究，不能对其生物学特性、与治疗之间的关系及其机理进行深入研究。 本课题旨在通过建立微卫星稳定及不稳定的结直肠癌细胞模型，筛选重要的 差异分子，探