食管癌患者生存期和单核苷酸多态和免疫功能状态关系.pdf

摘要 食管癌患者生存期与单核苷酸多态和免疫功能状态关系 博士研究生 张冬云 导 师 王立东教授 河南省食管癌重点开放实验室 郑州大学基础医学院 郑州450052 摘 要 1研究背景和目的 食管癌(Esophagealcancer,EC)是世界上最常见的六大恶性肿瘤之一，预后极 差，中晚期患者5年生存率仅15％左右。因早期EC无明显特异性症状，临床上 95％以上EC患者首次确诊时已是中晚期。令人惊奇的是，我们研究小组在EC 高发区现场随访普查中发现，一部分中晚期EC患者可长期生存达10年(超长 期生存，ultra-longersurvival，ULS)。这种现象的机制尚不清楚。进一步分析发现 无淋巴结转移和发病年龄早是食管癌患者超长期生存的重要影响因素。很显然， 阐明中晚期超长期生存食管癌患者的分子和免疫功能变化特征和规律对揭示这 一独特现象的分子机制和临床应用均具有重要意义。 本研究组已完成2．5万例EC和对照组全基因组关联分析(GWAS)研究， 发现2个EC易感基因(自然．遗传，2010)，证明了遗传的分子基础，但尚未阐 明GWAS发现的单核苷酸多态(SNPs)与EC生存关系。近年肿瘤免疫研究提 示机体免疫状态与肿瘤发生、发展密切相关。因此，本研究拟从SNP遗传变异 和免疫功能状态角度探讨EC患者超长期生存相关分子机制，即，(1)对比分析 万方数据 摘要 短期生存和ULS的EC患者临床病理变化，揭示ULS患者临床病理特征及相关 生存随访的EC患者中进行基因分型验证，并运用Cox多因素回归模型分析不同 基因型与患者生存时间关系；(3)采用流式细胞分析(flow 肿瘤组织中进行验证，确定食管癌预后相关免疫分子。 2研究对象 2．1超长期食管癌患者临床病理特征及影响因素分析：从本室已建立的超长期和 短期EC资料库中，根据明确病理诊断、治疗方式、生存期随访结果及问卷调查， 23，538例。 国汉族人。采集每位患者及正常对照3-5ml外周静脉血，．20。C储存。 2．3外周血中生存相关免疫分子分析：进入流式细胞分析的研究对象共278例， 例，男性28例，女性17例；生存期5．10年组34例，男性19例，女性15例； 例)。肝素钠抗凝管采集每位患者及正常对照外周静脉血10ml，无菌操作。 2．4组织微环境中生存相关免疫分子分析：进入免疫组织化学分析的研究对象共 发区、低发区57例，EC家族史阳性者70例、家族史阴性者155例。 II 万方数据 摘要 3研究方法 3．1问卷调查、随访及病理诊断和治疗情况复核 通过对河南安阳、林州、鹤壁、新乡等EC高发区进行EC现场流行病学调 查，确定EC患者，进行入户问卷调查和随访，记录患者一般资料(年龄，性别， 家族史，治疗医院等)。最终进入本研究分析的患者均经入户调查和随访。随访 截止时间为2013年3月15日。 根据患者口述治疗医院和时间，到相应治疗医院对患者临床病理资料(以病 理诊断为准)包括患者确诊时间、病理诊断、组织类型、分化程度、TNM分期、 淋巴结转移、治疗情况(外科手术、化疗、放疗)；一般体格检查(身高、体重、血 压等1进行复核，未找到原始住院记录者，不进入最终分析。采用SPSS19．0统计 软件处理数据，组间比较采用卡方检验，Cox比例风险回归模型进行多因素生存 分析，检验水准取a=0．05。 3．2 GWAS筛选生存相关SNPs Human61 之间。初筛选用Illumina