气道平滑肌被动度和收缩力维持及相关调控机制的研究.pdfVIP

万方数据 Regulation of Passive Stiffness and Force Maintenance in Airway Smooth Muscle A Thesis Submitted to Chongqing University in Partial Fulfillment of the Requirement for the Doctor’s Degree of Engineering By Bo Lan Supervised by Prof. Linhong Deng Specialty: Biomedical Engineering Bioengineering College of Chongqing University, Chongqing, China October 2014 万方数据 万方数据 中文摘要 摘 要 哮喘病（Asthma ）是目前世界上最常见的慢性呼吸道疾病之一，并已经被公 认为是人类公共卫生健康的重大威胁，但令人遗憾的是，我们至今还不能很好地 解释哮喘病的发病机理和发展过程。哮喘病最主要的病理学特征是气道受到刺激 之后的过度收缩反应，又被称为气道的高反应性(Airway Hyperresponsiveness, AHR) 。 气道平滑肌作为主导气道收缩的因素，它的力学行为及其收缩性能，包 括其刚度，收缩力，力-速率关系等力学特性，对于气道的力学反应和哮喘病研究 具有重要的生理病理学意义，然而目前我们对于平滑肌力学性质的了解目前还存 在很大的空白，近期研究结果显示，哮喘病人的气道平滑肌在受到拉伸之后，维 持收缩力和恢复收缩力的能力显著高于健康人；另一方面，气道平滑肌的刚度， 作为调节气道可扩张性的重要因素，一直以来被作为哮喘研究的重要目标。因此， 本研究在众多的气道平滑肌力学性质之中选择了气道平滑肌刚度和维持收缩力的 能力作为研究方向，采用了气道平滑肌组织，探索了刚度和维持收缩力作用以及 其背后的信号通路和超微结构，主要的研究内容和结果如下： 1）气道平滑肌刚度可以独立于主动收缩力被调控，而Rho 激酶（ROCK ）是 调控这一机制的信号通路。为了观察细胞骨架刚度的变化，我们建立了细胞膜透 化的气道平滑肌组织，分离了肌球蛋白磷酸化和主动收缩对刚度产生的影响，实 验中搭配使用钙离子和乙酰胆碱作为调控因子，观察记录并分析被动刚度变化。 -9 -4 结果表明细胞骨架刚度并非完全被动, 在pCa=10 的情况下10 M 乙酰胆碱仍然可 以显著提高通透化平滑肌的刚度，更重要的是，在平滑肌刚度增加的同时，并没 有检测到主动收缩力的产生，肌肉继续维持静息张力，与此同时未侦测到任何肌 球蛋白轻链 （MLC20 ）磷酸化。进一步研究显示， ROCK 抑制剂H1152( 1μM)完 全沉默了这一被动刚度变化，而调控主动收缩过程的肌球蛋白轻链激酶（MLCK ） 抑制则对这一刚度反应没有影响。 2 ）气道平滑肌维持收缩力的能力，特别是在收缩中对抗机械拉伸的机制