25型蓝知病病vp7和vp2蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备.pdf

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2016-02-20 发布于贵州
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25型蓝知病病vp7和vp2蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备

目录目录 JIIIIIIIIIIIHIIIllllllPIIIIIIIIrllJIIf Y2772234 摘要………………………………………………………………………………………………I 英文摘要………………………………………………………………………………………．III 1前言…………………………………………………………………………………………………………………………．1 1．1蓝舌病病毒概述…………………………………………………………………………．1 1．1．1蓝舌病病毒的病原特征及分类地位…………………………………………………1 1．1．2蓝舌病病毒基因组结构………………………………………………………………1 1．1．3蓝舌病病毒编码的蛋白………………………………………………………………2 1．1．4蓝舌病流行病学特征………………………………………………………………．．2 1．1．5蓝舌病临床症状和病理变化…………………………………………………………3 1．1．6蓝舌病病毒疫苗的研究进展…………………………………………………………3 1．2蓝舌病病毒的诊断方法…………………………………………………………………．．4 1．2．1 BTV血清学检测方法…………………………………………………………………4 1．2．2 BTV分子生物学检测方法…………………………………………………………．．5 1．3蓝舌病病毒的生物安全…………………………………………………………………．6 1．4单克隆抗体的研究进展…………………………………………………………………．7 1．4．1单克隆抗体的概述…………………………………………………………………．．7 1．4。2蓝舌病病毒蛋白单克隆抗体的制备…………………………………………………．7 1．5研究的目的意义…………………………………………………………………………．7 2材料与方法……………………………………………………………………………………9 2．1试验材料…………………………………………………………………………………9 2．1．1细胞、病毒与抗体…………………………………………………………………一9 2．1．2质粒与菌株……………………………………………………………………………9 2．1．3实验动物……………………………………………………………………………．．9 2．1．4引物……………………………………………………………………………………………………………．．9 2．1．5培养基和主要试剂…………………………………………………………………一9 2．1．6主要试剂的配制……………………………………………………………………10 2．1．7主要实验仪器设备…………………………………………………………………12 2．2试验方法………………………………………………………………………………一13 2．2．1重组VP7和VP2蛋白的表达与鉴定……………………………………………．．13 2．2．2重组VP7和VP2蛋白的纯化……………………………………………………．．18 9 2．2．3免疫动物……………………………………………………………………………．1 2．2．4杂交瘤筛选方法的建立……………………………………………………………．19 2．2．5杂交瘤细胞株的建立与筛选………………………………………………………．20 2．2．6单克隆抗体效价的测定……………………………………………………………．22 I 万方数据东北农业大学农学硕士学位论文 2．2．7单克隆抗体生物学特性鉴定………………………………………………………．22 3结果………………………………