一株嗜酸乳杆菌化亚油酸生成共轭亚油酸的条件研究.pdfVIP

摘要 linoleic 紫外诱变和化学诱变，获得一株产共轭亚油酸(Conjugatedacid,CLA)较为稳定 条件进行了优化研究，尤其是对LISl菌株提高发酵乳中CLA条件进行了优化研究， 以期为我国功能性乳制品开发和生产提供试验参数和理论依据参考，具有一定的理论 意义和实践价值。 1．嗜酸乳杆菌生长曲线的研究，用紫外分光光度计每隔2h测定一次L．S菌株的 吸光度值，绘制L．s菌株生长曲线。研究表明：前4h是延迟阶段，4～16h为菌体的 对数生长期，以后逐渐进入稳定期。 2．采用平板计数法，对菌体细胞采用紫外诱变和化学诱变方法，研究菌体致死率。 研究结果表明，用紫外线照射5s和硫酸二乙酯作用30min，菌体细胞致死率分别达 到72％和75％。 3．对诱变菌株L．s1特性进行了研究，试验结果表明：菌体生长周期有所变化， 对数生长期缩短，稳定期延长；菌落变大，菌体变长变粗；菌体产酸性增强；L．Sl 菌株转化LA为CLA稳定性较好。 4．运用五因素二次旋转正交组合设计建立了L．S1菌株产CLA发酵优化条件的回 归模型为： 1．67X42-2．94X52 在MRS培养基上诱变菌株L．S1产CLA的最佳条件为：在培养温度37’C，培养时间 为24h，pH4．7，接种量6％，LA浓度0．1％条件下CLA产率达至lJ31．2％。 5．在嗜酸乳杆菌转化LA生成CLA条件优化中，进一步研究了亚油酸诱导培养、 振荡培养、微氧环境以及吐温．80乳化分散对产CLA量的影响，试验结果表明：诱导 培养、振荡培养、微氧环境和吐温．80均能提高CLA产量。 6．采用单因素试验，研究发酵过程“菌体浓度、底物浓度和产物浓度”等状态变量 随发酵时间变化的规律及控制变量的关系。发酵过程中每隔3h取一次样，进行生物 量(菌体干重)、葡萄糖浓度、pH值和CLA生成量测定。结果表明：在菌体生长方 面，0～3h菌体生长缓慢，是乳酸菌在发酵培养基中的适应阶段，从3h起，菌体开 始快速增长，进入对数生长期，15h后菌体生长缓慢进入稳定期。在底物(葡萄糖) 消耗方面，从3h起，耗糖加快，18h以后耗糖减慢。在产物CLA生成方面，3h后缓 慢生成产物，6h后产物生成加快，进入产物快速生长期，24h时产物生成最多，以后 逐渐减少。 7．以经诱变的L．S1菌株发酵添加亚油酸的脱脂乳，试验用三因素二次正交旋转 组合设计，对发酵脱脂乳生成CLA的条件进行了优化试验，结果表明：培养温度37 佳回归模型为： 关键词：嗜酸乳杆菌 诱变 亚油酸 共轭亚油酸 条件优化 Ⅱ Abstract A linoleic L．S1witsscreened high mutant from conjugatedacid(CLAl producing 1．1854afterUVand studies Lactobacillusacidophilus on characteristicsofL．Slwere ofL．S1 conducted．Optimizationsynthesizingconjugated linoleieacidwas to researchedsearchfor conditions．In formation optimum addition,CLA conditionsoffermentationskimmilkwas hadacertain