五味子dna指分析及质量相关研究.pdf

摘要 摘要 本文应用RAPD及ISSR分子标记，对来源于黑龙江、吉林、辽宁、北京的北五味 子和购于四川、湖南、山西、西委丽五睬子共20分样本进行了DNA指纹分析。从100 个RAPD引物和30个[SSR引物中分别筛选出20、9个扩增结果稳定、扩增条带清晰的 引物。使中．8个RAPD引物和5个ISSR引物扩增出的带可以将南、北五味子区分开。 用筛选＼出的引物对所有五味子样本进行PCR扩增，得到DNA指纹图，同时对电泳条带 进行基于遗传相似度的聚类分析。从DNA指纹图中可见南、北五味子内部同一引物扩 增出的条带基本相同；在南、北五味子闯，仅有少数引物得到可以明确区分两者的不同 条带。计算得南、北五味子作为两种不同物种的遗传相似度为0．575：南、北五睐子不 同居群间的遗传相似度范围分别为O．856～0．947、O．902～0．993。这与指纹图显示的信息 一致，即南、北五味子内部不同居群间的遗传变异很小，作为不同的物种两者的遗传背 景有较大差异。 在药物有效成分含量分析方匿，本文采用《中华人民共和国药典》中规定的高效液 相色谱法对所有样本进行了五味子醇甲的含量测定。同时，尝试使用了先进的毛细管电 泳法。两种方法测得的结果相关性好，相关系数r=0．9596。实验所用全部北五味子中五 味子醇甲的含量均高于药典中规定的O．4％，是合格的五味子药材。其中产于南岔的北五 D18对 味子含量最高，达o．829％，其次为本溪、呼玛。结合DNA指纹分析，引物SBS 这三者均扩增出一条特异带，其它产通南、北五味子无此带。人／2、一 本研究筛选得到的RAPD及ISSR引物可用于南、北五味子类药材的分子鉴定。南 岔地区的五味子质量好，五味子醇甲岔量高，是培育五味子优良品种的首选引种之地。 引物SBS1318扩增所得特异带可初步作为五味子品质优良的特异性标记，在种苗的早期 品质鉴定方面应用价值很高。 关键词南五味子：北五味子；RAP。；ISSR；唾孽簪夏《一 on DNA Wuweizi Studies Fingerprints and Correlation Quality Abstract from ofBeiwuweizicollected Twenty samples Xian RAPDand from and were Nanwuweiz analysed broughtSichuan，Hunan，Shanxi by and and selectedfrom100 30 ISSRmolecular 9ISSR marke【s．Twen可RAPDprimers primersⅥ啊e 5ISSR respectively,andcouldprodtzedqualifiedfragmenls．Amongthese two Were PcRwiltallselected