牛α-acti基因启动子的改造及其功能验证.pdfVIP

JIIMIIIIIIIIJllllllJJIIlllJIIIfllllrlJ Y2771763 目 录 一 目 录 摘要………………………………………………………………………………………．．I 英文摘要…………………………………………………………………………………III l引言……………………………………………………………………………………．．1 1．1真核生物启动子研究进展…………………………………………………………．1 1．1．1I类启动子………………………………………………………………………．1 1．1．2 II类启动子………………………………………………………………………2 1．1．3 III类启动子……………………………………………………………………．．2 1．2组织特异性启动子在应用的过程中存在的问题及解决的方法……………………2 1．2．1通过突变负调控元件来改善启动子的活性……………………………………2 1．2．2利用基因的内含子来改善启动子的活性………………………………………．3 1．2．3通过多拷贝启动子来增加活性…………………………………………………3 1．2．4通过多拷贝增强子来增加活性…………………………………………………3 1．2．5通过多拷贝或高表达正调控元件增加启动子活性……………………………．3 1．2．6利用人工转录因子增加启动子活性……………………………………………4 1．2．7利用绝缘子增加启动子活性……………………………………………………4 1．3肌肉特异性启动子调控元件研究进展……………………………………………．．4 1．3．1Spl／KLFs元件…………………………………………………………………………………………5 1．3．2 ZF5F元件………………………………………………………………………………………………．5 1．3．3 Pax3元件………………………………………………………………………………………………．．5 1．4骨骼肌a．actin基因及其启动子的研究进展………………………………………．5 1．4．1骨骼肌a．actin及其基因………………………………………………………．．6 1．4．2骨骼肌a．actin基因启动子……………………………………………………一6 1．5研究的目的及意义…………………………………………………………………．7 2材料与方法……………………………………………………………………………．．8 2。l主要实验材料………………………………………………………………………8 2．1。1菌株、质粒与细胞………………………………………………………………8 2．1．2工具酶、试剂盒和其他试剂……………………………………………………8 2．1．3主要仪器………………………………………………………………………．．9 2．1．4主要试剂的配制…………………………………………………………………9 2．1．5 DNA分析软件…………………………………………………………………．1l 2．2实验方法……………………………………………………………………………．11 2．2．1常规的分子生物学实验技术……………………………………………………11 2．2．2牛c【．actin基因启动子的定点突变……………………………………………．14 2．2．3连接内含子的牛仅．actin基因启动子真核表达载体的构建……………………17 2．2．4牛基因双启动子的真核表达载体的构建………………………………………19 万方数据 东北农业大学农学硕士学位论文