vrib12基缺失马耳他型布氏杆菌m5-90疫苗株的研究.pdf

摘 要 布氏杆菌病是五种世界范围内由细菌引起的传染性人兽共患疾病之一，布氏杆菌为革兰氏阴 性，无芽孢，兼性厌氧的胞内寄生菌，分为7个种：Brucella suis(猪 neotomae 种)，Brucellaabortus(牛种)，Brucellaovis(绵羊种)，Brucellacanis(犬种)，Brucella maris(海洋种)。造成公共卫生危害的主要是羊种、牛种和猪种布氏杆 (沙田鼠种)，以及Brucella 菌，其中以羊种危害最为严重。 血清学监测对动物布氏杆菌病的防控和净化具有极为重要的意义。我国目前应用的布氏杆菌 感染无法区别的问题，对布病防控带来极大的困扰，迫切需要研发新型标记疫苗。 virBl2基因是布氏杆菌Ⅳ型分泌系统中的编码基因之一，而IV型分泌系统已被证明是布氏 杆菌主要的毒力因子，有研究表明VirBl2蛋白位于布氏杆菌细胞表面，并可能在侵染宿主细胞 时起重要作用。相关研究表明VirBl2蛋白能够诱导宿主产生相应抗体，是具有实际应用价值的 布氏杆菌病血清学诊断靶抗原。M5．90疫苗株是将羊种M5疫苗株在鸡成纤维细胞上传代90次 之后而得到的毒力减弱的疫苗株，在我国得到广泛应用于牛羊的布氏杆菌病防控，其安全性和有 染和疫苗免疫反应的标记疫苗。 为此，本研究首先利用大肠杆菌重组表达了VirBl2蛋白，作为检测抗原，建立了检测相应 抗原的间接ELISA方法。利用该方法检测了60份布氏杆菌阳性山羊血清及30份布氏杆菌阴性 山羊血清，检出符合率为91．7％，证明重组VirBl2蛋白对山羊布氏杆菌病的检测具有良好的特 异性和敏感性。 力。 综上，本研究验证了VirBl2蛋白可以作为布氏杆菌的一种血清学标记，并为布氏杆菌标记 疫苗的构建提供了一个新的候选基因。 关键词：vJrBl2基因，VirBl2蛋白，布氏杆菌标记疫苗，布氏杆菌检测 Abstract Brucellosisisoneofthefivemostcommonbacterialzoonosesintheworldcaused byorganisms tOthe bacteria． belonginggenus The Brucellaconsistofseven melitensis genus species：Brucella China, ovis(sheep)。B．can／s(dogs),B．neotomae(woodrats)，andB．maris(marinemammals)．In Brucella themostharmfulto health, melitensis，B．suis(hogs)andB．abortus(cattle)are public B．melitensis。 especially Themethodsof detectionofBrucellosisare controland of tothe serological significant prevention S2are in this 19and them