枸杞多糖对双酚所致小鼠睾丸生精细胞凋亡的保护作用研究.pdf

摘要 A，BPA)广泛存在于环境当中，其对人类及动物生殖 工业原料双酚A(bisphenol barbarum 系统的不良影响备受关注。研究证实，枸杞多糖(Lycium 能够提高机体抗氧化能力，调节小鼠生殖内分泌系统的功能，从而有效对抗双酚A造 成的生精损害。本试验通过BPA构建小鼠睾丸损伤模型，运用免疫组化方法和流式细 凋亡蛋白表达及DNA倍体的变化，研究枸杞多糖对双酚A所致小鼠睾丸生精细胞凋亡 的影响，并探讨枸杞多糖抑制双酚A诱导小鼠生精细胞凋亡的机制。将50只雄性昆明 小鼠，正常饲养七天后随机分为5组(10只／组)，分别为正常对照组、BPA组和三个不 同剂量的枸杞多糖组。除对照组注射等量橄榄油外，其余各组连续7d腹腔注射20 mg·k百1 mg．k互I．d的BPA，建立生精损伤模型。同时枸杞多糖组分别灌服50、100、200 不同剂量的LBP，对照组和BPA组灌服等量生理盐水。组织切片观察睾丸组织病理学 运用流式细胞术分析DNA倍体测定细胞凋亡率。睾丸组织病理结果显示，枸杞多糖 对双酚A诱导的小鼠睾丸组织结构损伤有明显的改善作用，100和200mg·kg-1的LBP 组曲细精管结构与BPA组比较有显著改善；免疫组化结果表明，BPA能够使凋亡蛋白 量(P0．05)。添加LBP后，200 (PO．01)，添加枸杞多糖后100 mg·k百1LBP组和200 于正常组(PO．01)；添加枸杞多糖后凋亡率较BPA组下降，其中100mg·k百1LBP组和200 比均有所增加，4C所占百分比与正常组相比差异显著(PO．05)。 结论：枸杞多糖可调控凋亡途径中相关蛋白的表达，通过增加线粒体途径中凋 亡抑制基因Bcl．2的表达，减少凋亡促进基因Bax的表达，抑制死亡信号受体途径 中Fas和FasL凋亡蛋白的表达，减少Fas和其配体结合，从而抑制凋亡执行蛋白 Caspase．3的活化，阻碍凋亡的启动，最终抑制双酚A所致的生精细胞凋亡；运用 流式细胞术分析DNA倍体测定细胞凋亡率，明确LBP可降低生精细胞凋亡率，并 可增加四倍体细胞百分比，从而保证生精细胞分化过程中四倍体精母细胞进一步分 化形成精子细胞，最终确保单倍体成熟精子的生成数量，保证睾丸生殖功能。 关键词：枸杞多糖；双酚A；氧化应激；细胞凋亡；免疫组化；流式细胞术 Protective Effectsof Barbarum on Lycium Polysaccharides Cell Induced SpermatogenicApoptosisby AinMouse Bisphenol AuⅡlor：Li，Xiao-cai Advisor：Prof．Ma，Ai-tuan Medicine Major：Clinical Veterinary Abstract aindustrial BisphenolA(BPA)iS rawmaterialWhich existinthe widely environment．Theadverseeffectsof BP