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树脂固定化漆酶其降解刚果红染料废水的研究
稻要
摘要
游离漆酶不稳定,对周围环境较为敏感,难以重复利用,酶的固定化技术是
近些年来解决以上问题的有效手段。本课题使用具有良好生物兼容性的330弱碱
性环氧系阴离子交换树脂(简称330树脂)为载体,采用戊二醛作为交联剂固定
化漆酶,研究了载体对漆酶的固定化效果。通过单因素实验确定漆酶的最佳单因
素固定化条件:交联剂戊二醛浓度为1%、交联时间为8
h、交联温度为30C、固
mol/L、
nd、PBS离子浓度为O.1
定化pH为3.0、酶稀释倍数为100、给酶量体积为10
固定化时间为5h,固定温度为25℃。
将响应面法(RSM)应用到漆酶固定化条件优化体系中,考察固定化过程中多因
素间的交互影响,结果表明:酶稀释倍数是影响固定化酶活的首要因素,并且与
其他2个主要影响因素交互作用明显。优化条件下验证实验结果为:固定化酶活
平均结果为11.26 ulg,该模型可
U/g,与模型的理论值11.99U/g的差值仅为0.73
以较好地反映出利用330树脂固定化漆酶条件。
以ABTS作为底物对固定化漆酶与游离漆酶酶学性质进行了比较:固定化漆
h,相对酶活仍然保持初始酶活的80%以上,而游离
酶在pH=3.5的环境中保存l
漆酶则相降至70%左右;固定化漆酶在25C-45℃下进行固定化漆酶的热稳定性
测试,随着时间延长,固定化漆酶的活性下降速率明显减缓:循环使用10批次的
固定化漆酶的酶活回收达到45%以上。
固定化漆酶对刚果红的降解最适pH值为6.0,向偏中性方向移动;刚果红浓
度为10mg/L时,脱色效果最好,脱色率可达到70%:连续使用5次后固定化酶
活还能够保留在40%以上。多数金属离子对酶活的抑制作用不太明显,Fe2+对酶活
具有明显抑制作用,而Cu2+对酶活有一定的促进作用;除Fe2+外,其他离子的存
在对刚果红的脱色率没有太大影响;适当增加Cu2+和C,的浓度,脱色率有一定
3%。
程度的升高;加入混合金属离子后酶活大约降低了1
关键词:漆酶;固定化;交换树脂:脱色;响应面
IIIIIIIllllllllll
‘。。’’’’。qYUlllllll9311111111111111119721111
Abstract
——.置』塑一l
was the environment
Asa laccascmoresensitiveto surrounding
biocatalyst,free
means
anddifficulttO immobilizationisaneffectiveto
reuse,theenzyme technology
solve this basic anion
theabove of epoxy
problems.Inpaper,applicationweakly
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